罗格列酮诱导裸小鼠胃癌移植瘤细胞分化及其机制的研究-消化内科学专业毕业论文.docxVIP

原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的 地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包 含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共 同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。 作者签名：陈方志 日期：2005年5月22日 关于学位论文使用授权说明 本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有 权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论 文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文； 学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。 作者签名：陈方志 导师签名：张刑 日期：2005年5月22日 主要英文缩略语索引PPAR 主要英文缩略语索引 PPAR Y Peroxisome proliferators—activated过氧化物酶体增殖因子 receptor gamma 活化受体Y ROS Rosiglitazone 罗格列酮 PBS Phosphate buffer solution 磷酸盐缓冲液 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 FCM Flow cytometry 流式细胞术 ATRA All trans retinoic acid 全反式维甲酸 PI Propidium iodide 碘化丙啶 4 罗格列酮诱导裸小鼠胃癌移植瘤细胞分化及其机锒I的研究 罗格列酮诱导裸小鼠胃癌移植瘤细胞分化 及其机锒I的研究 硕士研究生； 陈方志 导 师：张硎教授 中文摘要 目的 研究过氧化物酶体增殖因子活化受体Y(peroxisome proliferateration-acfivated receptor gamma，PPAR Y)配体罗格列酮 (Rosiglitazone，ROS)对低分化人胃癌MGC一803细胞裸小鼠移植瘤的抗增殖和 诱导分化作用，初步探讨ROS诱导裸小鼠胃癌移植瘤细胞分化的可能机制。 方法 培养入胃癌MGC一803细胞，将其收集后种植蓟裸鼠背部皮下，观 察种植后裸鼠的成瘤情况，筛选成瘤的裸鼠。将成瘤的裸鼠25只分为5组，加 上未种瘤组，分别为：正常组(A)、荷瘤未用药组(B)、阳性药物对照组(维甲 酸1lmg／kg)(c)、低剂量实验组(罗格列酮25mg／kg)(D1)、中剂量实验组(罗 格列酮50mg／kg)(D2)、高剂量实验组(罗格列酮100mg／kg)(D3)，每组5只。 待移植瘤长至大小约100mm3时开始分别给(c一腿)组裸鼠灌胃绘药(均为每两目 ～次)，A组及B组自由迸食。每隔5日分别测量每只裸鼠移植瘤的大小并给裸 鼠称重，40日后，处死裸鼠，解割显微镜下检溺各组移植瘤的大小，并称重， 计算抑瘤率；取血清检测血糖及肝、肾功能，评价药物的毒副作用；HE染色观 察移植瘤细胞形态学及肿瘤血管生成情况；流式细胞仪检测细胞周期：免疫组化 检测胃粘蛋白(Gastric Mucin／Mucin 5AC)。 结果1、裸鼠体重：处死前裸鼠体重，B组体重明显减轻，与其他各组问 的体重差别有显著性(PO．05)；各用药组间、A组与各用药组的体重差别无显 著性(P0．05)。 2、用药后对移植瘤体积的影响：B组瘤体积较其他各组大，与各用药组间 瘤体积差别有显著性(p0．01)；C组、Dl组、D2组、D3组抑瘤率分别为69．34％、 44．23％、71．79％、72．98％；Dl组与其他3组的抑瘤率比较差异有显著性(P0．05)。 3、组织学观察：HE染色发现B组的癌细胞最丰富，血管数最多，其次是 Dl组，其他用药组的血管生成较少。 4、Mucin 4、Mucin 5At表达：免疫组化显示D3组的Mucin表达最强，C组表达其次， DI组与D2组的表达均较少，B组几乎没有表达。 5、细胞周期显示：模型组B组Gl期细胞百分数为52．2％，S期百分数为 42．4％，c组、Dl、D2、D3组G1期细胞百分数分别为：59．6％、55．3％、59．3％、 53．5％；S期细胞分别为：22．0％、32．8％、30．1％、24．1％； 随着ROS剂量的增 加，G1期细胞增加，S期细胞减少，D3组与C组Gl期、S期细胞数无显著差异 (PO．05)。 结论 1、罗格歹Ⅱ酮剂量在25mg／kg以上能抑制移植瘤的生长，并随着用药浓度的 增加，抑瘤率也相应增加，达到一定浓度后，再增加剂量不能提高其抑 瘤效果；50mg／kg罗格列酮抑瘤率与1lmg／kg维甲酸抑瘤率相当。 2、罗格列酮剂量达100m g瓜g时诱导胃癌MGC．803裸小鼠移植瘤细胞分 化作用明显