慢病毒介导的基于microRNA系统的RNAi技术抑制HBV复制及相关肿瘤信号转导通路的研究-外科学(肝胆)专业毕业论文.docxVIP

第二l 巨大学 2ω4 级博士毕业论宜 慕本缆跑跑襄 英文缩略词褒 cccDNA Closed circularωiI创 DNA cDNA Complem侃侃ryDNA CMV Cytomegalovin蹄 DB陀 Di自由ylpyro创巾咄咄跑 DMEM Dulb咽ωsMωified Bagle M创íum dsRNA Double-strand RNA EDTA Ethylene díamíne旬raacetic acid ELlSA Enzymelinked immunosol也entωsay FBS Fetal Bovine S町um GFP G饰en f1uo防部跚跚阳回，teio HBsAg Hepatitis B virus su?ace antigen 闭环螺旋DNA Ii.补DNA 巨细胞病毒 焦碳酸二乙酶 DMEM培养基 双链RNA 2.二乙肢囚乙酸 酶联免疫吸附实验 胎牛JíIl消 绿色荧光i!i臼 乙型肝炎病毒表困扰原 HBV Hepatitis B virus 乙裂肝炎病毒 HBx Hepati时5 B vírus X proteín 乙骂自肝炎病毒x i!i白 HCC H句眯阳lIularωrciooma 肝细胞癌 LHBs Long hepatitis B v刷刷f脚 antigen 大乙肝农阁蛋白 míRNA MícroRNA MOI Multiplicity of infectioD PAGE PolyAcrylamíde Gel Electrophoresis PBS Phosphate Butfered Salíne PCR PI叮merase chaín reaction PTGS Post例时iipíωnaJ gene silenciog R1SC RNA.índuced siliencíngωmplex RNAi RNA in饰rference RT.PCR 民.ev防部衍割lSCriplase PCR  小RNA II!H酷复数 聚丙烯凝胶咆泳 磷酸盐缓冲液 多聚酶链反应 转录后基因沉默 刚A诱导的沉默复食物 RNA 干扰 反转录PC鼠 siRNA ssRNA 民NA TGS Small. ín惊rference RNA Sin脚础刷刷A Small.temporal RNA Transcriptional gene silenciog 小干扰RNA 单链RNA 小时序刚A 转录水平基因沉默 Qlflgba? αetII EIUImI 制协阳II11Su.哝仰H呻制Smlnd Mi刷刷 MedI，ωU时，嘟嘟 第 lJ! 挂创性声日E 本人声明厨呈交的学位论文是我个人在导师捂导下进行的研究工作。 除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰 写过的研究成果，与我一!可工作的商志对本研究所做的任何贡献均已在论文 中作了明确的说明并表示谢意。本人承捏本声明的法律责任。 学位论文出名:和乡、牛签字叫: 0) 年归问 学位论文使用授权书声明 本人完全了解第二军重大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留 并向自家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，先许论文被查{司和借 障。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据 库进仔检索，可以采用影印、缩印或扫插等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位拙作者签名:和中东 导押签名: 在抖和 签字百期: 0) 年 h f-J (O 日 签字日期 :2--OV7年 ιf-J II E 第二旦在医大擎 2004 组博士毕业论文 盗采盒里E 懒惰毒介导的罄于 microRNA 果锐的 RNAi 技术抑制 HBV 擅 制及相关肿瘤惰号转辱通路的研究 肝细胞痛 (HCC) 是人类肿瘤中少数问病草草感染相关的肿瘤之一，乙型肝炎病草草 (HBV) 感染是肝细胞癌发生的主要诱因，两种病毒调节蛋白乙型肝炎病毒 X 蛋白(}册川和大褒 il?旨臼 (LHBs) 的延时过最表达可以便细胞内原来受到抑制的~些荔阔的转录过穆解除控 制，从而促进细胞增尘，同时使肝细胞对其他促癌因予更为敏感.通过 pre-miRNAs结构 也可以携带 siRNA 进入细胞内发挥 RNAi 作用，发挥作用模式接近于人体生理情况.构 建携带 HBx RNAi 靶点基于 miRNA 系统的愤病毒，以不同感染复数 (MOI)倍感染 HψG2.2.15细胞，利用 EUSA 方法和 w四阳咀 blot 方法分析细胞内外 E也sAg表达水平变化， 实时荧光定量 PCR 方法分析mRNA 水平的变化，同时对细胞声音养上消中 HBV DNA 遂行 定:1:; HψG2.2.1