抗精子多肽抗体的制备和对人精子功能影响的实验研究-妇产科专业毕业论文.docxVIP

抗精子多肽抗体的制备和对人精子功缝影响的实验研究摘 抗精子多肽抗体的制备和对人精子功缝影响的实验研究 摘 要 (受精过程包括精予成熟、附着、缩合、顶体反应、穷卵、融合、皮质 反应、戳方配予豹带反应和核浆黛等过程，而抗精予抗体可通过降低糕予速 度、减少矮体反应率、撺销精郛结合等途径来影响精予受精功能，导致免疫 性不孕。攀』髑猜子抗绦来制作避孕疫菌，已成为免疫避孕的研究热点。 精_予蛋白SPl7位于精予联体部位，与精予顶体跨膜蛋白Cyritestin 一样，均程耩一舞透嚼带结合、精一卵膜结合和融合过程中发挥踅耍作用7”本 婿究利用已经获褥静含SPl7和cynmsfin表位的人工合成35肽(P3肷)和 抗P3肽兔壶溱，探讨抗犸抗体与入精子的结合和对受精过程的影响及其 程度，评俊入王会残豹P3默对入精予动能的影晌，旨在对其生物学特性进 行涤入研究。 ， (实验分强部分避杼。第一部分运用试箭盒，将P3多欣通过EDC与KLH 载体蛋白结会，凳痰BAL影c小鼠，牧获血清经过柱纯亿。获得抗P3抗体， 霞FITC盛接糠记，逶避流式缁脆仪检测抗体与精予结合的阳性率，即抗体 与人穗子麴结会率，翳荧光显徽镜观察抗体与入精予的结合部位，并且采用 免疫组化方法，以摭Cyritestin单抗强麓性对照，麓察含抗P3抗体的兔衄清 与入糖子鼹缝金部位。第二部分将入耩予与含抗体血清共同孵育，和用 CASA系统检测人穗子活动力，用FITC-PSA法及考马斯尧箍法检测顶体反 应霉，通过SPA法检测穿露率，评价抗体对入精予功能的影响及其程度。 抗体经纯他、标记螽与精子表霜的结含率珂达97．7％，抗体血清与入 精予孵商嚣，用单抗人IgG检测阳性率献49．2％降至36．4％，荧光遂徽镜见 精予头颈部黄色，鄂分照赤邀摄葳矮端荧光增强，免疫缀纯染色觅精予头部 着深福色，与麓往对照一致。摭体蠹清每人精予孵育器运动速度、各项运动 精予百分率及其他各I受攒标均显著下降，并且与抗体浓发交亿育一定关系， 1精子顶体反应率及穿卵率也显著下降。’土 1 精子顶体反应率及穿卵率也显著下降。’土 结论；P3肽在精子头部表面有表达，特异性抗P3抗体可与其高度结 合；抗P3抗体可显著影响精子的活动力、项体反应和穿卵率，可干扰精子 受精功能，因此P3肽对人精子受精功能有影响，具有一定的开发前景。 关键词：抗精子抗体。 流式细胞仪’ 顶体反应 计算机辅助精液分析系统 精子穿卵试验、／ Production Production of anti—sperm multiple peptide antibody and its effects on fertilization of human sperm Abstract There are many events in fertilization such∞maturation ofegg and sperm， attachment，binding，acrosomal reaction，penetration，fusion，cortical reaction， zona reaction and nuclear fusion ofboth gamete．It is well known that anti-sperm antibody could impair fertility in couples by resulting in immunological infertility through damaging sperm motility,reducing acrosome reaction， inhibiting sper／／1 penetration zona pellucida,and SO on．Many special sperm antigens have been utilized to prepare contraception vaccine for controlling fertilization,which is focused in immunological contraception research． Sperm protein SpI 7 is one of sperm antigens on acrosomal cap，and carl bind specially with ovum zona pellucida．Cyritestin，a cross-membrane protein of aerosome，as Spl7 Can also effect on sperm penetration．Both Spl7 and Cyritestin play important role in proce