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第三章 微生物发酵动力学;研究对象:菌体生长、基质消耗、产物生成三者间的动态平衡及内在规律。
研究目的:为最佳发酵条件控制提供依据。 ;;生化反应: aA + bB ? cC + dD;发酵动力学研究的几个层次(尺度);课程重点:主要针对微生物发酵的表观动力学,通过研究微生物群体的生长、代谢,定量反映细胞群体酶促反应体系的宏观变化速率,主要包括:
细胞生长动力学
底物消耗动力学
产物合成动力学
重点定量研究底物消耗与细胞生长、产物合成的动态关系,分析参数变化速率,优化主要影响因素。
但研究过程中将涉及三个层次的研究方法,达到认识微生物本质特征、解决发酵工业问题的目的。;发酵动力学研究的基本过程 ;本章主要内容;第一节 分批发酵动力学;
;; 1.1 细胞生长动力学;;;;;; 微生物生长特性通常以单位细胞浓度或细
胞数量在单位时间内的增加量来表示(μ、μn):;;分批发酵动力学-细胞生长动力学;现象:
活菌数没增加,曲线平行于横轴。
特点:
生长速率常数= 0;
细胞形态变大(长);
细胞内RNA特别是rRNA含量增高;
合成代谢活跃,易产生诱导酶;
对外界不良条件敏感。
原因:
适应新的环境条件,合成新的酶,积累必要的中间产物。
影响延迟期长短的因素:
菌种
接种物菌龄(对数生长期)
接种量(大,易形成优势)
培养基成分(合成与天然培养基);;;分批发酵动力学-细胞生长动力学;;Decline(开始出现一种底物不足的限制):
(1)若不存在抑制物时
Monod 模型:
;式中: S—限制性基质浓度,mol/m3
Ks—底物亲和常数(也称半饱和速度常数),表示微生物对底物的亲和力 , mol/m3 ; Ks越大,亲和力越小, μ越小。
① 当S较高时,(对数期满足S10Ks),此时,μ= μm
② 当S较低时,(减速期, S10Ks),此时S↓,μ ↓
∴ 减速期, μ ↓
;比生长素率μ;酶促反应动力学-米氏方程:;Monod方程应用:
测定微生物对不同底物的亲和力大小(Ks值);
实验确定适于微生物生长的最佳底物;
比较不同底物发酵最终残留的大小;
比较不同微生物对同一底物的竞争优势,确定连续培养的稀???率
;Stationary:
;
dying:
;分批发酵动力学;其它模型1;培养液中有抑制物的情形
① 高浓度基质抑制存在的情况下
式中,Kis为抑制常数,抑制作用越强,Kis越小 ;② 高浓度产物抑制的情况下 ;分批发酵中初始底物浓度对稳定期
菌体浓度的影响 ; 当培养基中存在多种限制性营养物时,
Monod方程应改为?;例 题;解:依据方程s/μ=Ks/μm+1/μm·S(莫诺方程变形),分别采用图解和回归法求解。
计算与表中S相对应的S/μ分别为:110、108、137.5、129、148.8、192.5、203.3、231.8、246.4、311.3、287.7。对S/μ—S作图。
;; 得率系数; 消耗每克营养物(s)或每克分子氧(O2)生成的产物(P)、ATP或CO2的克数。
;定义:表观得率
专一性得率
*专一性用于生长的底物量△S’不含用于维持能耗及产物形成部分的用量。;;; 基质消耗速率与生长、合成关系如下:
表观:
专一性:
;为了扣除细胞量的影响,
定义:基质比消耗速率
产物比生成速率
;=;1/Yx/s; 若生产阶段微生物生长可以忽略,即;; 根据发酵时间过程分析,微生物生长与产物合成存在以下三种关系:
与生长相关→生长偶联型
与生长部分相关→生长部分偶联型
与生长不相关→无关联;相关型;与生长相关→生长偶联型:乙醇发酵;与生长部分相关→生长部分偶联型:乳酸、柠檬酸、氨基酸发酵;与生长不相关→无关联:抗生素发酵
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