20XX年DNA的重组与转座培训课程.pptVIP

◎转座子的转座机制 自学 转座子插入到DNA上新的位点，首先交错切开靶DNA，再将转座子连接到靶的凸出单链上，最后填补空缺完成转座。 按在转座过程中是否发生复制，可以分为： 复制型转座 非复制型转座 1979年Shapiro提出了转座模型 这个过程开始是形成单链转移复合体[有时也称为交换复合体]，供体和靶的单链连接，这样转座子的两个末端分别与靶及供体单链相连接。连接转移复合体产生了一个交换形成的结构在双链转座子处结合在一起，这个交换结构（即共同中间体）决定了转座方式的命运。交换结构的每个交错末端含有一个单链区。这个区域是个假的复制叉。它提供了DNA合成的模板。若复制继续，那么它的延伸将经过转座子，将它的链分开，在其末端终止复制，然后由连接酶封闭缺口。这个结构变成了共合体。在转座子与复制子之间的连接处有DR。复制可能由宿主编码的酶来完成。　 这个模型解释了： 复制性转座在原来的位置上保留原有的Tn； 在新位置上转座子的两端出现正向重复靶序列； 转座过程中出现共合体。 复制型转座 在复制型转座中，整个转座子被复制了，一个拷贝保留在供体的原来部位不变，另一个拷贝即原转座子的拷贝则插入到受体的位点上，供体和受体都有一个转座子的拷贝，所以，通过转座转座子的拷贝数得到了扩增。转座酶和解离酶在转座过程中分别作用于原始转座子和复制转座