绿原酸缓解大鼠肠道线粒体氧化损伤-营养与食品卫生学专业毕业论文.docxVIP

摘 摘 要 万方数据 万方数据 摘 要 随着经济发展、生活方式和膳食结构的巨大变化，代谢综合征（如高血脂 症、糖尿病、心血管病）的发生率越来越高，严重危害人类健康。线粒体是机 体细胞内能量代谢和自由基产生的主要场所，一旦代谢过程或自由基增减平衡 被破坏，就会危害机体并产生疾病。研究表明线粒体功能障碍是引起慢性代谢 疾病重要的病理基础，如糖尿病、衰老、心血管疾病和癌症等，因此，提高线 粒体质量，降低线粒体损伤，从而抑制自由基的产生是缓解慢性代谢疾病的重 要途径之一。本文通过体外实验和体内实验，在大鼠肠道线粒体水平上，探讨 绿原酸对氧化损伤线粒体的保护作用及可能机制。 本文第一部分探讨绿原酸在体外对大鼠肠道线粒体氧化损伤的保护作用。 方法：不同浓度的 H2O2 损伤线粒体，测定线粒体肿胀度、膜电位和 ROS, 确定 H2O2 最适浓度；不同浓度的 CHA 加入线粒体悬液，测定线粒体肿胀、膜 电位 和 ROS, 确定 CHA 最适 浓度 。 试 验 分 四 组 ： 正 常 组 、 H2O2 组 、 160μmol/LCHA+H2O2 组、160μmol/LCHA 组。测定线粒体悬液及上清液中细胞 色素 C、8-OHdG 含量、T-SOD、GSH-Px、T-AOC 及复合物 I、IV 和 V 活性。 结果：（1）H2O2 的最适浓度为 0.5mol/L；（2）CHA 的最适浓度为 160μmol/L； （3）160μmol/LCHA+H2O2 组的线粒体悬液细胞色素 C 含量比 H2O2 组显著增多 （P0.05）；(4)160μmol/LCHA+H2O2 组中 8-OHdG 的量比 H2O2 组显著降低 （P0.05）；（5）与 H2O2 组比，160μmol/LCHA+H2O2 组 T-SOD、GSH-Px 活性 显著增强（P0.05），T-AOC 增强且具有极显著性（P0.01）；（6）与 H2O2 组比， 160μmol/LCHA+H2O2 组线粒体复合物 I、IV 和 V 活性增加且具有极显著性差异 （P0.01）。 本文第二部分探讨绿原酸在体内对大鼠肠道线粒体损伤的保护作用。 方法：选用 32 只健康大鼠（180±20）g，随机分成四组：正常组、TNBS 组、 CHA 组、CHA+TNBS 组，每组 8 只，实验期四周，TNBS 剂量为 100mg/Kg,绿 原酸每日经口灌胃，剂量为 60mg/Kg。本部分做了肠道形态学观察，组织学评 分，测定回、结肠 T-SOD、T-AOC 活性，MDA 含量，电镜观察线粒体结构，测 定线粒体悬液及上清液细胞色素 C 含量，8-OHdG 含量，T-SOD 活性，MDA 含 I 量，复合物 I、IV 和 V 活性。 结果：(1) HE 染色显示 CHA+TNBS 组肠道绒毛结构比 TNBS 组完整，组织 评分图显示两组具有显著性差异（P0.05）；（2）CHA+TNBS 组回、结肠 T-SOD 活性、T-AOC 能力高于 TNBS 组，且 T-SOD 活性出现显著性（P0.05）；与 CHA+TNBS 组比，MDA 含量在 TNBS 组升高，且有显著性（P0.05）；（3）TNBS 组电镜图显示线粒体膜破裂，脊断裂或消失，线粒体基质减少且模糊不清晰， 线粒体体积变大变圆发生肿胀，在 CHA+TNBS 组损伤症状得到缓解；（4）与 TNBS 组比，CHA+TNBS 组线粒体悬液细胞色素 C 含量增加；（5）CHA+TNBS 组复合物 I, IV 和 V 活性高于 TNBS 组，且复合物 I 和 V 具有显著性差异 （P0.05）。 综上所述，绿原酸对大鼠肠道线粒体的损伤具有缓解作用。在体外，绿原 酸对线粒体复合物 I, IV 和 V 具有保护作用；在大鼠体内，绿原酸对损伤的肠道 组织，肠道抗氧化能力，肠道线粒体，肠道线粒体抗氧化及线粒体复合物 I, IV 和 V 均具有保护作用。 关键词：绿原酸；抗氧化；线粒体；氧化损伤；呼吸链复合物 II AB ABSTRACT ABSTRACT The incidence rate of metabolic syndrome (such as hyperlipidemia, diabetes, cardiovascular disease) is more and more high, and harmful to human health since there are the great changes of economic development, lifestyle and dietary structure, Mitochondria are the main places of cellular energy metabolis