黄芩苷元抗肿瘤作用的体内研究-生物学专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 Classified Index: Q71 U.D.C: 577.21 Dissertation for the Master’s Degree in Science THE AITI-TUMOR EFFECT OF BAICALEIN IN VIVO Candidate： Biao Liu Supervisor： Prof. Huanjie Yang Academic Degree Applied for： Master of Science Speciality： Biology Affiliation： School of Life Science and Technology Date of Defence： June, 2014 Degree-Conferring-Institution： Harbin Institute of Technology 哈尔滨工业大学理学硕士学位论文 哈尔滨工业大学理学硕士学位论文 摘 要 前列腺癌在欧美地区的发病率常年居高不下，一直严重威胁着中老年男性 健康，近年来我国男性前列腺癌发病率也在逐渐升高，用于前列腺癌尤其是非 雄激素依赖性前列腺癌治疗的药物研发日益重要。蛋白酶体抑制剂类药物，如 硼替佐米等，作为抗癌药物研究的新领域，通过特异性抑制蛋白酶体活性抑制 肿瘤细胞生长，在临床应用上已经取得了很大的成功。但是目前已有的蛋白酶 体抑制剂类药物对正常机体多具有较大毒性，且在实体瘤治疗上作用有限，仍 有很大的药用潜力等待被挖掘。 我国传统中草药内天然存在的一些化合物相较于人工合成药物往往具有较 低的生理毒性，其复杂多样的结构与功能如同巨大的药物分子宝库，一直吸引 着研究人员的目光。天然存在的蛋白酶体抑制剂雷公藤红素即为雷公藤中提取 所得，具有较强的肿瘤生长抑制效果，是中药有效成分应用于癌症治疗研究的 又一突破。 本课题组通过计算机模拟实验，寻找到几种具有潜在蛋白酶体抑制作用的 中药有效成分，黄芩苷元作为其中各项分子对接结果良好的一种黄酮类化合 物，在预实验中能够有效抑制 20S 纯化蛋白酶体糜蛋白酶样活性，证实了其蛋 白酶体抑制剂的作用。通过细胞学实验发现，黄芩苷元可以与前列腺癌细胞内 的蛋白酶体可逆结合阻断泛素蛋白酶体途径，造成细胞内泛素化蛋白积累，也 可以通过泛素蛋白酶体途径以外的细胞通路诱导细胞死亡。值得注意的是，从 实验结果中可以看出黄芩苷元本身稳定性差，并且对不同种类细胞的抑制效果 有较大差别。在细胞学实验的基础上，本课题建立了裸鼠前列腺癌异植体模 型，在体内试验中探究黄芩苷元对肿瘤生长的抑制效果。在 20 mg/Kg/天的用药 量下处理 28 天后，裸鼠身体机能正常，说明药物浓度在安全范围内，但并未检 测到明显的肿瘤组织生长抑制。相同用药量下处理七天所得到的裸鼠肿瘤组织 中，蛋白酶体的活性也没有得到明显抑制。同时，在细胞学实验中观察到的非 蛋白酶体途径诱导的细胞死亡也没有在体内实验中被检测到，说明黄芩苷元较 高的不稳定性严重影响了它的各项功能。相比于已发表的文献，黄芩苷元在前 列腺癌细胞系 PC-3 所形成的异植体中呈现的阴性结果也表明该种药物的应用 具有一定的局限性。这些体内和体外实验结果可以为黄芩苷元的药物改良和衍 生物研发提供实验依据和理论基础，以期发现更为完善的蛋白酶体抑制剂类药 物。 关键词：黄芩苷元；前列腺癌；蛋白酶体抑制剂；异植体模型；肿瘤生长抑制 I - Abstract With a high morbidity rate in America and the euro area, prostate cancer have been a serious threat to the health status of middle aged and old men all the time. In recent years, the incidence of prostate cancer in China was gradually increased which makes the drug development for prostate cancer, especially androgen independent prostate cancer therapy more and more important. Proteasome inhibitors, like bortezomib, as a new aspect of anticancer drugs, have achieved a big success in clinic through specifical inhibition of the proteasome