慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚和脾胃湿热证候差异的蛋白组学研究-中西医结合内科学专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 前言 世界卫生组织（World Health Organization, WHO）2015 年最新发布的《慢性 乙型病 毒性 肝炎感 染 患者的 预防 、护理 和 治疗指 南》 中指出 乙 肝表面 抗原 （HBs-Ag）持续保持阳性达 6 个月或以上，即为慢性乙型病毒性肝炎（Chronic Hepatitis B，CHB），CHB 是极大的公共卫生问题。据估计世界范围内有大约 2.4 亿的慢性感染者，尤其是地中收入国家，每年因乙肝病毒（Hepatitis B Virus， HBV）感染而死亡的人数为 65 万左右，其中的大部分并不知道自已被 HBV 感 染，并且一但出现症状即属于并发症期或病程终末期。CHB 最主要的并发症是 肝硬化与原发性肝细胞癌，20%-30%的慢性感染者将最终发展为以上并发症。尽 管全球范围内针对新生儿的 HBV 免疫接种计划已经广泛开展，并且在 HBV 高 流行国家显著地控制了发病率与流行程度，但是该计划尚未对接种数十年后的 HBV 相关性死亡产生影响。 1995 年以来随着拉米夫定在我国 CHB 治疗中的使用，越来越多的核苷酸类 似物投入到临床。同时新型的聚乙二醇干扰素也极大改善了既往标准干扰素在 CHB 治疗使用中的不便。目前国内外的指南均提出最大限度地长期抑制病毒复 制，从而延缓肝脏疾病的进展，减少肝硬化、肝细胞癌或肝衰竭的发生为 CHB 治疗的目标，也形成了以核苷类似物为主或干扰素为主的标准抗病毒治疗方案。 尽管如此，治疗过程中病毒耐药、治疗时间长、治疗费用较高的问题仍然是我国 的 CHB 防治工作中的难度。针对此问题，国家十一五以来依托―艾滋病和病毒性 肝炎等重大传染病防治‖专项课题在全国范围内开展了多项多中心、随机研究。 目前如何优化 HBV 抗病毒治疗，提高乙肝 e 抗原(HBe-Ag)转阴率和 HBS-Ag 清 除率是现阶段我国感染科临床研究的热点问题。 传统医学虽然没有明确的“慢性乙型病毒性肝炎”病名，但历史上很早便出 现了“黄疸”“ 胁痛”“积聚”等记载。中医药治疗不仅具有“简、便、效、廉” 的特点，其特色的整体观认识系统，不仅可以在目前标准的抗病毒治疗疗程中起 辅助抗病毒治疗作用，同时还可以改善患者生存质量。为了进一步发挥中医药治 疗在我国乙肝防控中的优势，我国自 1984 起先后 7 次发布慢乙肝中医证候辨证 3 论治标准。尽管如此，目前学界关于慢乙肝中医辨证类型仍然存在较大争论，各 种具有主观性、经验性甚至刻意复杂化、神秘化的证候名与辨证方法不仅影响了 中医现代化进程中寻求标准化、客观化的目标，不利于中医推广，更在一定程度 上限制和干扰了中医药优势在乙肝防控中的推广。故而对于证候本质的找寻在中 医药研究中的重要性更加凸显。 从认识论角度分析，传统医学证候的本质是一种基于经验描述与归纳的理论 体系。历史发展中囿于时代限制，证候体系中实践的成分逐渐减少，代之以因文 字混淆及概念不清所造成的空洞思辨。在中医现代化过程中，对于证候源头的回 归并突破传统证候认识方法对症状、体征的观察归纳之局限，借助现代分子生物 学、数理统计学、循证医学等方法和技术找寻证候本质从而对证候体系实现辨证 地超越具有其必然性。目前来说，与中医理论类似同样基于整体论并借助计算机 技术、分子生物技术、统计学、生物信息学等一体的系统生物学对证候本质的研 究具有广阔前景，特别是通过对人体结构、功能的基本要素蛋白质全面的分析并 找寻这些蛋白质之间相互作用关系的蛋白质组学对证候本质的研究拥有极大意 义。 本课题研究目的在于探索同属于现代医学慢乙肝的病理状态中，肝郁脾虚、 脾胃湿热两证之间的差异表达蛋白，并对其进行生物学分析，得到证候之间差异 的物质基础以便从分子生物学层面探讨两证的内在联系与区别、发现两证之间可 能的生物标志物，为中医证候本质的现代化客观化研究提供依据。 4 中 文 摘 要 目的：采用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ)联合液相色谱串联质谱(1iquidchromatography tandem mass spectrometer, LC-MS/MS)技术对慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚证、脾胃湿热证患 者与健康志愿者的血清样本进行蛋白相对定量检测以分析、鉴定两证型之间的差 异性表达蛋白并对其进行生物学分析，以便从分子生物学层面探讨两证的内在联 系与区别、发现两证之间可能的生物标志物，为中医证候本质的现代化研究提供 依据。 方法：选取四川大学华西医院门诊及住院部符合西医、中医诊断标准及排除标准 的慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚证和脾胃湿热证患者及来自成都市的健康志愿 者作为研究对象。