黄芪总苷诱导NB4凋亡过程中死亡受体通路分子变化内科学(血液病)专业毕业论文.docxVIP

安徽医 安徽医科大学硕士研究生论文 PAGE PAGE 1 英文缩略词表 AL acute leukemia 急性白血病 AST astragalosides 黄芪总苷 RT-PCR reverse transcription polymerase chain reaction IKK inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase 反转录聚合酶链式反应 核因子-κB 抑制蛋白激酶 IκB inhibitor of nuclear factor kappa-B 核因子-κB 抑制蛋白 NF-κB nuclear factor kappa-B 核因子-κB mRNA messenger ribonucleic acid 信使核糖核酸 Caspase-8 cysteinyl aspartate specific proteinase 含半胱氨酸的天冬 氨酸蛋白水 解酶 8 ALL acute lymphatic leukemia 急性淋巴细胞性白血病 AML acute myelocytic leukemia 急性髓细胞性白血病 APL acute promyelocytic leukemia 急性早幼粒细胞性白血病 ATRA all transretinoic acid 全反式维甲酸 ATO arsenic trioxide 三氧化二砷 DC cell dendritic cells 树突状细胞 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 cDNA complementary deoxyribonucleic acid 互补脱氧核糖核酸 rpm rotation per mintune 每分钟转速 GAPDH glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 PBS phosphate buffer solution 磷酸缓冲液 DTT DL-dithiothreitol 二硫苏糖醇 TNFR tumor necrosis factor receptor 肿瘤坏死因子受体 DD death domain 死亡结构域 Fas L Fas ligangd Fas 配体 FADD Fas associated protein with death domain Fas 相关死亡结构域 DED death effector domain 死亡效应结构域 DISC death-inducing signaling complex 死亡诱导信号复合体 Apaf-1 apoptotic protease activating factor-1 凋亡酶激活因子 1 TNF tumor necrosis factor 肿瘤坏死因子 NIK nuclear factor kappa B-inducing kinase NF-κB 诱导激酶 NLS nuclear localization signal 核定位信号区 ANK ankyrin 锚蛋白 IAPs inhibitor of apoptosis proteins 细胞凋亡抑制蛋白 , 黄芪总苷诱导 NB4 凋亡过程中死亡受体通路分子变化 中文摘要 急性白血病（AL）属于血液系统恶性肿瘤性疾病，是国内十大高发恶性肿瘤 之一。治疗方法以化疗为主，但因传统化学药物较大的副作用，天然中草药逐渐 受到专家学者们的青睐，越来越多的中药被证实具有抗白血病作用且逐渐被应用 到临床。本课题组前期研究证明黄芪总苷（astragalosides ，AST）具有体外抑制 急性早幼粒细胞白血病细胞株 NB4 生长，并在一定范围内可以诱导其凋亡，凋亡 率呈剂量依赖性。基于此结果，本研究分别用不同浓度诱导 NB4 细胞凋亡，通过 测定相关分子变化以探明 NB4 细胞凋亡可能的机制。 目的 探讨 AST 诱导 NB4 细胞凋亡过程中死亡受体通路的各分子变化，以说明 AST 是否依赖死亡受体通路参与 NB4 细胞凋亡发生。 方法 取对数生长期的 NB4 细胞进行实验。不同浓度 AST（200、300、400 μg/ml） 作用 NB4 细胞 48 h 诱导其凋亡，分别记为 200、300、400 μg/ml AST 组，同时设 置细胞对照组。 1.使用台盼蓝染色法观察 NB4 细胞生长情况及经 AST 作用后细胞变化情况， 使用检测活力＞ 95%的 NB4 细胞进行以下实验。 2. 使用 RT-PCR 法检测各 AST 组及细胞对照组 IKKβ、IκBα、NF-κBp65 及 FasmRNA 相对表达量的变化。 3.使用分光光度法检测各 AST 组及细胞对照组 Caspase-