麦胚凝集素亲和色谱富集糖肽过程中的肽键裂解.PDFVIP

!# 年 $ 月 色 谱 ’()* !% +(* $ !#$% !# !#$%% ’()*$+, (- !*(.+/(0*+1 2 $# !’ 麦胚凝集素亲和色谱富集糖肽过程中的肽键裂解 $ ，! ! ! ! ! 卢- 庄 ，- 王京兰 ，- 贾- 伟 ，- 杨- 兵 ，- 蔡- 耘 ， $ $ $ ，! ! - 邓玉林 ，- 张玉奎 ，- 钱小红 （$* 北京理工大学，北京 $( $ ；! * 蛋白质组学国家重点实验室， 北京蛋白质组研究中心，北京放射医学研究所，北京 $!!+ ） 摘要：蛋白质的糖基化是最重要的翻译后修饰之一，与蛋白质结构和功能的关系密切。凝集素亲和色谱是蛋白质 糖基化研究中很常用的工具，不同的凝集素可以对不同的单糖或寡糖有特异的富集作用。麦胚凝集素（9:; ）由 于其特异作用的糖型广泛存在而成为使用最多的凝集素之一。在本研究中，发现将 9:; 用于糖肽亲和富集会导 致部分肽段的降解，从而导致后续的肽段序列分析的失败。本文用, 种标准蛋白质对这种现象进行了验证，结果 表明肽段的降解可以发生在多个位点，其中较多地发生在酪氨酸、苯丙氨酸及亮氨酸的羧基端。这一结果提示：在 糖蛋白质组研究中，如果应用 9:; 富集糖肽并采用质谱进行鉴定，则采用半酶切或非特异性酶切的检索策略更为 合适。 关键词：麦胚凝集素亲和色谱；糖肽；肽键；断裂；蛋白质组学 中图分类号： +)(- - 文献标识码：;- - 文章编号：$.(% $’ （!# ） $. $#.)- - 栏目类别：研究快报 !#$%$# ’( $)*+# ,’-+ +./*- 01’2#23*+# #-/*14)#-3 .5*- 64#$3 #/) $.3*-*- $((*-*30 14/’)$3’/$240 = ?5$#@ $ ，! ，9;+: !3#@)#! ，!A; 9-3! ，B;+: 83#@! ，7;A B$#! ， C1+: B$)3# $ ，?D;+: B$E$3$ ，FA;+ G3(5(#@ $ ，! ! （!! #$% $’ () *$*+ *# ,- .#/0,1,’2 ， #$% $’ !#! ，30$4 ；$ ! 5 *4*# 6 #2 7 48,94*,92 ,- : 9,*#,;$/) ， #$% $’ : 9,*#,; # #)#49/0 3# *#9 ， #$% $’ () *$*+ *# ,- 4=$4*$, #=$/$# ， #$% $’ !$$% ，30$4 ） 7,53/$13 ：;H (#- (I J5- 2(HJ 32K(%J#J K(HJ.J%#H)J3(#) 2(L3I36J3(#H （M,NH ），@)6(H)J3(# 5H H3@#3I36#J -II-6J (# J5- HJ%$6J$%- #L I$#6J3(#H (I K%(J-3#H* #- (I J5- 32K(%J#J J(()H I(% @)6(K%(J-3# %-H-%65 3H )-6J3#H ，O5365 %- E#(O# J(