氯通道阻断剂对bFGF诱导下的晶状体上皮细胞增殖和迁移的影响-@@专业毕业论文.docxVIP

福建医科大学 福建医科大学 2010 级硕士研究生毕业论文 PAGE PAGE 5 2. 不同浓度的氯通道阻断剂作用于 bFGF 诱导的晶状体上皮细胞 48h 后，细胞内 Ki-67 蛋白表达细胞数有不同程度下降，差异存在统计学意义（bFGF+NPPB 组： F=580.3，P=0.000；bFGF+DIDS 组：F=507.4,P=0.000），且呈浓度依赖性抑制 Ki-67 表达。其中 150μmol/L NPPB 组和 100μmol/L DIDS 组 Ki-67 的阳性细胞率分别下 降至（18.32±1.23）%和（11.21±1.02）%，与 bFGF 处理组相比较，差异均有统 计学意义（P0.01，P0.01）。 3. PI 染色流式细胞周期检测结果示与空白对照组和 bFGF 组相比，150μmol/L NPPB 组 和 100μmol/L DIDS 组 细胞增殖能力下降 ， G0/G1 期细胞比例升高 （(F=390.754，P=0.000），S 期比例减少（F=166.240，P=0.000）。 Transwell 实验结果表明，150μmol/L NPPB 及 100μmol/L DIDS 作用 24-48h 细胞迁移数较 10μg/L bFGF 处理组少，具有较明显的抑制作用（F=56.039，578.746， P0.001）。且 150μmol/L NPPB 及 100μmol/L DIDS 作用 24h 后，细胞迁移抑制率 分别为 35.44%、54.43%（F=56.039，P0.001）。划痕实验结果显示，氯通道阻断 剂 150μmol/L NPPB 及 100μmol/L DIDS 作用 24h 后能到有效地抑制 10μg/L bFGF 诱导的细胞横向迁移，并呈时间依赖性。 结论: 10μg/L bFGF 可以促进 HLE-3 细胞增殖移行，而 150μmol/L NPPB 及 100μmol/L DIDS 作用 24h 能够可以有效的抑制 10μg/L bFGF 诱导的 LECs 增殖及移行。即 NPPB/DIDS 作为氯通道阻断剂，在一定范围内能够抑制由 bFGF 诱导的人晶状体 上皮细胞增殖及移行，且呈时间、浓度双重依赖性。 【关键词】 细胞增殖，细胞迁移，氯通道，碱性成纤维细胞生长因子，晶 状体上皮细胞 The effects of chloride channel inhibitor on bFGF-induced proliferation and migration of lens epithelial cells Postgraduate:Zhang min-hua Supervisor:Prof,Wengjingning ABSTRACT Objective To study the role of chloride channel on proliferation of Human lens epithelial cells induced by basic-fibroblast growth factor (bFGF). Methods HLE B-3 at Logarithmic growth phase were cultured in DMEM wit-l high glucose and observed with inversion light microscope. Different concentrations of Chloride channel inhibitor:5-nitro-2-( 3-phenylpropylamino) benzoicacid(50、100、 150μmol/L)/ 4，4-diisothiocyanatostibene 2,2disulphonicacid（10、50、100μmol/L） in the presence of 10ug/L bFGF， were added in the culture plate to treat LECs with bFGF or without bFGF in 20% serum group for 24、48、72 hours, respectively．The CCK-8 colorimetric assay was used to check the cell viability and evaluate the drug toxicity．The effects of Chloride channel inhibitor on bFGF-induced proliferation of LECs were analyzed