过敏性哮喘患者外周血IL17和IL23水平变化及临床意义.docVIP

过敏性哮喘患者外周血IL-17和IL-23水平变化及临床意义 (武汉市汉口医院重症医学科 湖北 武汉430012) 【摘要】目的：探讨过敏性哮喘患者外周血白细胞介素-17(IL-17) 和白细胞介素-23(IL-23)水平变化及其临床意义。方法：40例过敏性哮喘患者作 为实验组，另选40例健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附(ELISA)实验检 测患者外周血中及外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中IL-17和IL-23的水 平，并分析其于哮喘严重程度的相关性。结果：实验组患者血浆中和PBMC培养 上清液中ILJ7和IL-23水平均明显高于对照组(Pt;0.05)o随着哮喘严重程度 增加，血浆中ILJ7的水平逐渐增加，具有显著性差异(Pt;0.05)o实验组患者 血浆中和PBMC培养上清液中IL-17与IL-23水平均呈现正相关性 (r=0.527,0.426;P=0.004z0.019)0结论：过敏性哮喘患者外周血IL-17和IL-23水平 明显上升，IL-17和IL?23可能影响哮喘的发展，ILJ7水平或许可以用来辅助判断 哮喘的严重程度。 【关键词】过敏性哮喘；白介素J7；白介素临床意义 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752 (2015) 33-0057-02 过敏性哮喘是一种由多种细胞和细胞因子介导的气道炎症性疾病，往往由尘嫡、 花粉、娣螂等过敏原引发产生，严重影响人们的身体健康和日常工作。有文献报 道[1],辅助性T细胞(Th) 17在过敏性哮喘的发生与发展中有至关重要的作用。 Thl7细胞分泌的IL-17、IL-22等细胞因子在炎症性疾病中有重要作用，IL-17有促 进炎性反应的牛物学功能，参与过敏性哮喘的发牛[2]olL-23是一个上游调控Thl7 的因子，其能够诱导Thl7细胞分泌IL-17,从而参与过敏性哮喘的发牛和发展。 木研究探讨过敏性哮喘患者外周血ILJ7和IL?23水平变化及其与哮喘严重程度的 相关性，以期为临床上釆用诊断IL-17等因子判断疾病严重程度提供一定的科学 依据。 ?资料与方法 1.1 j般资料 选择2012年8月到2015年1月在我院就诊的40例过敏性哮喘患 者作为实验组，其中男18例，女22例，平均年龄34.7plusmn;7?2岁。纳入标 准：⑴症状符合中华医学会哮喘学组制定的《支气管哮喘防治指南》标准；⑵皮 肤过敏原实验(尘！花粉、蝉螂等)阳性；⑶血清特异性IgE阳性。排除标准： ⑴心、肝、肾功能不全者；⑵有心脏病及其他肺部疾病患者；⑶精神障碍者；⑷ 近期有呼吸道感染患者；⑸近期接收激素治疗患者。依照世界哮喘防治协会标准 ⑶，对40例哮喘患者进行严垂程度分级，其中轻度哮喘患者12例，重度哮喘 患者14例，重度哮喘患者14例。另外选择40例健康体检者作为对照组，其中 男20例，女20例，平均年龄32.2plusmn;8?3岁,均无心脏病及其他肺部疾病、 无近期有呼吸道感染、近期无接收激素治疗，均体检合格。两组患者年龄、性别 等资料均无显著性差异(Pgt；0.05),具有可比性。患者均知情同意，并经医院 伦理会批准。 1.2主要仪器和试剂 Lambda 25型紫外分光光度计，购自美国PE公司；TC2323型细胞 培养箱，购自美国Oregon公司；XD-202型倒置显微镜，购自南京江南永新光学 有限公司；TG16-WS型台式高速离心机，购自上海赵迪生物科技有限公司。 小牛血清，购自美国Sigma公司；人淋巴细胞分离液，购自挪威 Oslo公司；IL-17与IL-23酶联免疫吸附(ELISA)检测试剂盒，购自美国RD公司。 Hankj夜，由 8g NaCL 0.4g KCL 0.06g Na2HPO4 0.06g KH2PO4 和 0.35g NaHCO3 完全溶解于lOOOmL注射用水中配制而得。 1.3 PBMC的分离和培养 PBMC的分离:采集患者外周静脉血12mL于加入肝素的离心管中, 加入等量Hank溶液，混匀。在15mL规格离心管中加入3mL人淋巴细胞分离液， 后加入混匀的外周静脉血6mL,放入高速离心机，于2000r/min,离心25miru 后吸取离心管中从上到下第二层液体于新置离心管中，加入等量Hank溶液混匀, 于1000r/min,离心lOmin来洗涤细胞，洗涤两次，备用。 PBMC的培养：将分离的PBMC洗涤后加于含有10%小牛血清的RPMI 1640培养 液中，适当调整细胞密度为1.5times;106个/mL,悬浮培养。 1.4检测指标 采用ELISA法检测两组患者血浆中和PBMC培养上清液中IL-17和 IL?23水平，具体操作步骤严格按照实际和说明书，所有样本和标准品均设定复 孔o IL-17的最低检测限为3.2pg/mL