抗犬瘟热高免卵黄抗体的制备及其应用效果研究-兽医学专业毕业论文.docx

Study on Separation of immunoglobulin of Yolk against Caine Distemper and effect on Clinical Application A Dissertation Submitted to Shihezi University In Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master of Agriculture By Wang Jian-mei (Veterinary Master) Dissertation Supervisor:Prof. Yan Gen-qiang Senior Veterinary Surgeon Liu Si-guo May,2012 石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明 学位论文独创性声明 本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除 文中已经注明引用的内容外 ，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究 做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。 研究生签名： 时间： 年 月 日 使用授权声明 使用授权声明 本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主 管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。 有权自行或许可他人将学位论文编入有关数据库提供检索服务。有权将学位论文的标题和摘要汇编 出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。 研究生签名： 时间： 年 月 日 导师签名： 时间： 年 月 日 I I 摘 要 目的：犬瘟热和犬细小病毒病是目前在我国养犬业中发病率最高的两种疾病之一，且病死率很 高，对犬进行疫苗接种是预防犬瘟热的有效措施之一，但由于受疫苗、免疫程序及个体差异等原因 的影响，仍有部分免疫犬因感染而发病。因此探讨犬瘟热的有效治疗制剂一直是养犬业临床领域关 注的课题。 方法：本研究建立了抗犬瘟热高免卵黄抗体间接血凝试验（IHA）检测方法。蛋白含量为 0.5 mg/ml 松狮犬的犬瘟热病毒组织抗原凝集效价最高。研究结果表明，蛋白含量为 0.5 mg/ml 松狮犬的犬瘟 热肝脏组织抗原致敏红细胞作为犬瘟热病毒卵黄抗体 IHA 是完全可行的。 以犬瘟热和犬细小病毒二联弱毒疫苗和石河子当地犬瘟热肝组织灭活处理后作为抗原，以 IL-16 和卡介苗作为佐剂，用本研究自己设计的免疫程序和方法免疫蛋鸡后获得特异性卵黄抗体（IgY）， 经提取卵黄液后进行卵黄液的无菌检验、物理性状检测和安全性检测，结果表明符合安全条件；对 卵黄抗体用酸化法、水稀释法和盐析法分别粗提后，检测 IgY 的效价盐析法获得了成功，而其它两 种方法未能检测出 IgY 的效价。 结果：试验 A 组 78-84d 收集鸡蛋 IgY 效价最高，效价达到 1:8192，用自制 CDV 灭活组织苗注 射制备的卵黄抗体其效价远高于二联疫苗注射制备的卵黄抗体效价水平。试验 A 组 78-84d 收集鸡蛋 IgY 最适合用于犬瘟热病犬的治疗。 经过对粗提后卵黄抗体的安全性检验，说明口服和肌肉注射后制备的卵黄抗体是安全的，可以 用于治疗。在试施支持疗法和对症疗法的基础上，应用抗犬瘟热、细小病毒二联卵黄抗体辅助治疗 试验组与高免血清+单抗治疗对照组比较，对犬瘟热及细小病毒感染犬的治愈率分别是 43.75%和 83.33%，结果表明，两组治疗比较结果均差异不显著(P＞0．05)。说明治疗呼吸道型犬瘟热患病犬 在发病早期应用卵黄抗体辅助治疗可行，治疗肠炎型犬细小病毒患犬应用卵黄抗体辅助治疗也是可 行的。 结论：本研究建立了抗犬瘟热高免卵黄抗体间接血凝试验（IHA）检测方法，以犬瘟热和犬细小 病毒二联弱毒疫苗和石河子当地犬瘟热肝组织灭活处理后作为抗原，以 IL-16 和卡介苗作为佐剂， 用本研究自己设计的免疫程序和方法免疫蛋鸡产生卵黄抗体合理，应用 IgY 辅助治疗犬瘟热、犬细 小病毒病有效，为今后深入研究和应用特异性 IgY 辅助治疗犬瘟热、犬细小病毒奠定了一定的基础。 关键词：犬瘟热；犬细小病毒；卵黄抗体；IHA；应用效果 论文类型：B（应用研究） 2 2 II II Abstract Canine distemper(CD) and Canine parvovirus infection is the two severe infection diseases in canine farming at present, and it has a highly mortality. One of effective measures was to