生物化学试验基本操作玻璃仪器的规格和使用吸管.DOCVIP

第二章 生物化学实验基本操作 第一节 玻璃仪器的规格和使用 一、吸管的使用 计量仪器的选择应根据量取液体的体积大小而定，同时要考虑量取的准确度(表2-20)。 表2 -1计量仪器的选择标准 计量仪器 最佳量程 准确度 滴管 30μl至2ml 低 量筒 5-200Oml 中等 容量瓶 5-2000ml 高 滴定管 1-25ml 高 吸管/移液枪 5μl至10ml 高 微量注射器 0.5-10ml 高 天平 任何量度(取决于天平的准确度) 极高 锥形瓶/烧杯 25-500Oml 极低 吸管(吸量管)为精密计量容器，生化实验中经常使用。 （一）吸管的类型 1．移液管 即单刻度吸管 （1）普通单标吸管 它的中部有一圆柱状空泡，只能量全量。当所量取的液体自行流出后，使吸管尖端在受壁上停留3-5秒，所余少量液体不必吹出，因为其固定倾出容量已经检定。 （2）奥氏吸管 它具有一相当大的卵形空球及一短小的出口。当将所量取的液体放出后，必须将遗留在管尖内的少量液体吹入受器内。某些奥氏吸管带有玻璃塞。在所有的吸管中以奥氏吸管的准确度最高，常用于定量实验。 2. 吸管 即多刻度吸管 （1）普通吸管 它是直筒状吸管，其上有多个刻度。北京玻璃厂生产的吸管， 1ml以下(不包括1ml)都必须把尖端遗留的液体吹入受器中，新产品都注明有“吹”字。1ml以上(包括1ml)则不吹出尖端遗留的液体。当液体不再流出时，应使该管尖紧靠受器内壁一段时间。这种吸管又分为慢流速、快流速2种。按其容量和精密度不同，慢流速吸管又分为A级与B级，快流速吸管只有B级。使用时，A级最后停留15秒， B级最后停3秒，同时需转动吸管。 （2）莫氏吸管 总量刻度在尖端以上，卸放液体时按刻度进行。 （二）刻度吸量管移液操作 1. 选取原则：每根吸量管上有许多等分的刻度，在刻度标记有自上而下和自下而上两种，规格为0.1 ml，0.2 ml，0.5ml，1ml，2 ml，5 ml，10 ml等。在一次完成移液的前提下，应选用容积较小的吸量管，对于同一次实验中同一种试剂的移取，应选用同一支吸量管。 2．操作过程： 图2—1 刻度吸量管移液操作 （1）执管：拇指执吸量管上部，使吸量管保持垂直，食指按在管口上调节流速，刻度朝向操作者； （2）取液：把吸量管插入液体，用洗耳球吸取液体至所需刻度上方，移开洗耳球，迅速用食指压紧管口，然后抽离液面。调准刻度：用食指控制液体至所需刻度(此时液体凹面、视线和刻度应在同一水平线上) （3）放液：移开食指，让液体自然流入容器内。此时，管尖应接触容器内壁，但不应插入容器的原有液体中(否则管尖会沾上容器内试剂，再移液时致使试剂交叉污染)。待液体流尽，将最后液滴吹出或转动吸量管使其沿容器内壁流出。 （4）洗涤：吸取血浆，尿及粘稠试剂的吸量管，用后应及时用自来水冲洗干净。如果吸取一般试剂的吸量管，可待实验完毕后再洗。 （三）吸管使用注意事项 1．对于多刻度吸管，有刻度到尖端的和不到尖端的；有读数是从上而下的，也有读数是从下而上的。使用时必须看清楚，以免发生差错。 2．执管时，要尽量拿上部，以食指堵住管口控制流量，刻度数字要向着自己。 3．不论使用哪一种吸管，都应以食指堵住吸管的上孔。当从液体中取出后，特别是吸取粘性大的液体时，必须先用滤纸将管的外壁擦干。放出所需液体时，必须使吸管尖端轻轻触及受器的内壁。 4．吸取溶液时要把吸管插入适当深度，避免吸空。严禁用口吸取，应在管口上方用一橡皮球吸而获取溶液。 5．应根据不同的需要量选用适当的吸管。例如吸取1. 5ml溶液时，以选用2ml吸管为宜，而5ml和10ml的均不适用。若以1ml的吸取2次，则因误差机会增多而不适宜。 6．读数时，管要垂直背对光线，眼与凹液面应在同一水平高度上。 7．吸管的洗涤:吸管用后，要以自来水冲洗数次，晾干后，以重铬酸钾-硫酸洗液浸泡1小时以上。如果是放入大量筒中浸泡，要注意在筒下应垫有玻璃纤维，并将吸管的尖嘴朝上。尖嘴部分若碰破残缺，则吸量不准；上口碰破残缺，则流量不易控制；二者均不宜使用，因此要细心保管。 （四）吸管的校正 首先以分析天平称出带盖称量瓶重量，然后用洁净干燥的吸管吸取蒸馏水至刻度处， 将蒸馏水移入称量瓶内，盖好盖再称其重，由前后2次的称量值求出吸管中水的重量，重复称量2 -3次取其平均值。再按水在校正温度下的相对密度求得校正体积。 二、微量可调加液管 微量可调加液管常用于吸取1ml以内的微量液体。此管由塑料制成，具有使用方便、取液迅速、不易破损、能吸取多种样品等优点。适用于连续取样和试液分装，目前广泛使用于临床生化检验中。微量可调加液