乳粉中乳糖的测定.PPTVIP

还原糖的测定──莱茵-艾农氏法 项目四 乳粉中乳糖的测定 学习任务 1. 查阅资料，总结奶粉中乳糖测定的原理和方法 2. 费林氏液的配制，乳糖标定费林氏液 3. 莱因-艾农氏法测奶粉中乳糖的含量 模块四 乳粉中乳糖的测定 任务要求 1. 查阅资料，总结测定奶粉中乳糖的原理和方法 2. 通过小组讨论并制定测定奶粉中乳糖的实验方案 3. 正确配制费林氏液并用乳糖进行标定 4. 正确测定奶粉中的乳糖含量 项目四 乳粉中乳糖的测定 所需掌握知识点 1.莱茵-艾农氏法的原理 样品经除去蛋白质以后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液，样液中的乳糖将费林氏液中的二价铜还原为氧化亚铜。以次甲基蓝为指示剂，在终点稍过量时，乳糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基蓝。根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。 项目四 乳粉中乳糖的测定 项目四 乳粉中乳糖的测定 费林氏液由甲、乙液组成，甲液为硫酸铜溶液，乙液为氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液。平时甲、乙液分别贮存，测定时才等体积混合，混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀。生成的氢氧化铜沉淀与酒石酸钾钠反应，生成酒石酸钾钠与铜的络合物，使氢氧化铜溶解。 项目四 乳粉中乳糖的测定 酒石酸钾钠铜络合物中的二价铜是一个氧化剂，能使还原糖氧化，而二价铜被还原成一价的红色氧化亚铜沉淀。 反应终点用次甲基蓝指示剂显示。次甲基蓝是氧化能力较二价铜更弱的一种弱氧化剂，故待二价铜全部被还原糖还原,过量一滴还原糖立即使次甲基蓝还原，溶液的蓝色即消失。反应终点应为氧化亚铜的砖红色。 项目四 乳粉中乳糖的测定 2、试剂 费林氏液（甲液及乙液） 乙酸铅溶液（200 g／L） 草酸钾—磷酸氢二钠溶液 次甲基蓝溶液（10 g／L） 250mL三角瓶（蒸馏水洗净烘干） 酸式滴定管(0-50mL、0.1mL精确度) 250mL、100mL容量瓶 5mL、50mL移液管 电炉子 项目四 乳粉中乳糖的测定 3、仪器 项目四 乳粉中乳糖的测定 4、操作步骤 （1）、用乳糖标定费林氏液: 称取预先在92~94℃烘箱中干燥2h的乳糖标样约0.75g（准确到0.2mg ）,用水溶解并稀释至250mL。将此乳糖溶液注入一个50mL滴定管中，待滴定。 取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角瓶中。再加入20mL蒸馏水，从滴定管中放出15mL乳糖溶液于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s，加入3滴次甲基蓝溶液，继续滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。 项目四 乳粉中乳糖的测定 1）预滴定： 另取费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馏水，一次加入比预备滴定量少0.5~1.0mL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入3滴次甲基蓝溶液，然后继续滴入乳糖溶液（一滴一滴徐徐滴入），待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算的依据（在同时测定蔗糖时，此即为转化前滴定量）。 项目四 乳粉中乳糖的测定 2）精确滴定： 项目四 乳粉中乳糖的测定 （2）、乳粉中乳糖的测定 1）样品处理 称取2.5~3g样品（准确至0.01g），用100mL水分数次溶解并洗入250mL容量瓶中。 加4mL醋酸铅、4mL草酸钾－磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂时都要徐徐加入，并摇动容量瓶，用水稀释至刻度。静止数分钟，用干燥滤纸过滤，弃去最初25mL滤液后，所得滤液作滴定用。 预滴定： 将此滤液注入一个50mL滴定管中，待测定。取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馏水，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s, 加入3滴次甲基蓝。然后徐徐滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。 2）滴定 项目四 乳粉中乳糖的测定 精确滴定： 另取10mL费林氏液（甲、乙各5mL）于250mL三角瓶中，再加入20mL蒸馏水，一次加入比预备滴定量少0.5~1.0mL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入3滴次甲基蓝溶液，然后一滴一滴徐徐滴入乳糖溶液，待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算的依据（在同时测定蔗糖时，此即为转化前滴定量）。 项目四 乳粉中乳糖的测定