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黄芩苷提取条件的实验设计 【摘要】 目的：优选黄芩苷的提取工艺。方法：通过正交设计试验，以黄芩苷的得率为指标，考察粒度、温度、超声时间对提取效果的影响。结果：黄芩苷的最佳提取工艺为~的中档片加50%乙醇50倍量，温度60℃，超声振荡15min。结论：该提取工艺提净率高、简单方便。  【关键词】 黄芩； 黄芩苷； 正交试验  黄芩为唇形科植物黄芩的干燥根，具有清热燥湿，泻火解毒、止血、安胎的作用［1］。其主要成分有黄芩苷元、黄芩苷、汉黄芩素,此外尚含β-谷固醇等,其中黄芩苷是主要有效成分，具有抗菌、消炎之作用［2］。传统的提取方法有温浸法、煎煮法、加热回流法、索氏法等。超声波提取法是利用超声波的空化作用加速有效成分浸出的一种新 发展 起来的技术。超声方法与传统方法相比较，具有设备简单，提取时间短，提取率高等特点。本实验利用超声波提取法，设置L9(34)正交试验，以黄芩的含量为指标，紫外法检测，寻求超声提取的最佳提取工艺条件［3］。  　　1 仪器与试药  V-530型紫外分光光度计；AS150A型超声波清洗器；普利赛斯92SM-202A型 电子 分析天平。黄芩苷对照品。黄芩为市售药村，经周口市药检所鉴定。乙醇为分析纯，水为蒸馏水。  方法与结果  .1 原料的预处理  将黄芩净洗切制分为3档，厚度1~2mm为厚档片，~为中档片，以下的为薄档片。干燥后分装样品袋中，备用。  .2 黄芩苷的含量测定方法  . 测定波长的选择  精密称取黄芩苷对照品适量，用50%的乙醇溶液配制成为15μg/ml的溶液，以50%乙醇为空白，用V-530型紫外分光光度计，在200~350nm的波长范围内扫描，在278nm波长处有最大吸收。  . 标准曲线的绘制  精密称取60℃减压干燥至恒重的黄芩苷对照品于50ml量瓶中，加50%乙醇溶液溶解到刻度。精密量取上述标准液、、、、分别置50ml量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度，摇匀，在278nm波长处测吸光度，由吸光度对溶液浓度作线性回归。  回归方程为：A=+ r=  表明黄芩在μg~36μg范围内线性关系良好。  . 黄芩样品溶液的制备  精密称取黄芩样品，加50倍量的50%乙醇溶剂浸泡30min后，放入振荡器中。根据正交试验表选择一定的提取时间和温度进行超声处理后，过滤、补足滤液至50ml。精密量取上述滤液1ml至100ml量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度。  . 黄芩样品含量的测定  取项下的溶液在278nm波长处测吸光度，由回归方程 计算 出黄芩苷的对应波度。按下式计算黄芩苷的含量X%。  X%=C对×  .3 L9正交试验  取黄芩样品 精密称定，采用正交试验法以黄芩苷含量为 参考 指标，考察黄芩饮片厚度、提取时间和提取温度3个因素。  提取因素水平见表1，正交试验结果及方差分析见表2和表3。表1 正交试验因素水平表表2 L9正交试验结果表表3 方差分析表注： (2,2)=。  .4 方差分析  由表2、3可知，采用超声波直接提取法，以黄芩苷为提取率考察指标时，各因素对黄芩提取工艺影响的大小为CAB,其中提取温度对黄芩苷的提取影响最大，而提取时间对黄芩的提取影响最小。在试验范围内，最佳提取条件为A2 B2 C3，即用中厚度饮片 在60℃振荡15min。  .2重复试验按优选项A2 B2 C3进行重复试验。精密称定黄芩，中档片按分析方法中进行定量分析，结果表明本优选项下的重复试验的重现性好。  讨论  由本实验可以看出，黄芩饮片的厚度对黄芩的提取有一定影响，按一般常规片越薄，提取量应该越高，可能是中药成分复杂，各有效成分相互影响及变化，同样条件下中档片提取率高，随超声时间的延长，黄芩的提取量呈上升又下降的趋势，所以用中档片，在60℃超声处理15min提取工艺较为客观合理。  【参考 文献 】  　　1 国家药典委员会.中华人民共和国药典.北京：化学 工业 出版社，XX，211~212. 　　《中华药海》上卷.第一册.哈尔滨出版社,1998,35~438.　　刘玉萍，曹晖，等. 黄芩清除自由基活性与黄芩含量的相关性研究. 中国 中药杂志，XX，27(8)：575.