联合钙离子ATP酶2a和骨髓干细胞移植治疗心力衰竭的研究-老年医学-心血管病学专业毕业论文.docxVIP

解放军总医院军医进修学院博士论文中英文缩略词表 解放军总医院军医进修学院博士论文 中英文缩略词表 英文缩写 英文名称 中文名称 MSC msenchymal stem cell 骨髓间充质干细胞 SERCA2a sarcoplasmic reticulum Ca2+．ATPase2a 钙离子ATP酶基因2a CAR Coxsackie and Ad receptor 腺病毒受体 EGFP enhanced green fluorescence protein 增强型绿色荧光蛋白 MOI multiple of infection 感染复数 充血性 CHF C11ronic heart failure 心力衰竭 EF ejection fraction 射血分数 FS fraction shortening 缩短分数 DTI doppler tissue imagining 组织多普勒成像 LvDP left ventricle diastolic pressure 左室舒张压 the rising maXimum of left ventricle左室单位时间压力上升 Dp／dTmax pressure 最大值 the descending minimum of left左室单位时间压力下降 Dp／dTmin ventricle pressure 最大值 Dp／dtmax— absolute value of left ventricle pressure 左室压力变化绝对值 min MMP matrix metalloproteinase 基质金属蛋白酶 TIMP matrix metalloproteinases 基质金属蛋白酶抑制剂 HM Hibemating myocardium 冬眠心肌 terminal deoxynucleotidyl TUNEL tmsferase．mediated duTP nick e二末端脱氧核苷酸转移酶 介导的缺口末端标记法 labling， PI propidium iodide 碘化丙啶 HE hematein．eosin 苏木素一伊红染色 AI apoptotic index 凋亡指数 解放军总医院军医进修学院博士论文卵白素 解放军总医院军医进修学院博士论文 卵白素 DAB 3．3’．diaminobenzidine 3-3’一二氨基联苯胺 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链反应 ——————————————————————————————————————————一-一 2 一一一——————————————————————————————————————————————一 一一一——————————————————————————————————————————————一解放军总医院军医进修学院博士论文 联合钙离子ATP酶2a和骨髓干细胞移植治疗心力衰竭的研究 中文摘要 心力衰竭是各种心脏病的严重阶段，发病率和死亡率高，5年存活率和恶 性肿瘤相仿。心力衰竭的治疗日益受到人们的关注。虽然药物治疗心力衰竭 取得一定进展，但疗效有限，其它如心脏移植等外科治疗存在高风险，费用 昂贵等缺陷，因此亟需寻找更为安全有效的治疗方法。在心力衰竭的治疗策 略中，增加心肌细胞数目和纠正心肌细胞功能是治疗的两个主要方面。本研 究以骨髓干细胞为平台，腺病毒为治疗基因载体，联合钙离子ATP酶基因 (sarcoplasmic ret iculum Ca2+-ATPase，SERCa2a)和细胞移植治疗慢性充 血性心力衰竭。比较单纯SERCA2a基因治疗，骨髓干细胞移植以及联合基因 和细胞移植治疗心力衰竭的作用，探讨SERCA2a基因治疗，骨髓干细胞移植 治疗心力衰竭的可能机制，评价以SERCA2a作为基因治疗靶点和骨髓干细胞 作为平台应用于心力衰竭治疗的可行性。为寻找慢性心力衰竭尤其终末期心 力衰竭的高效安全的治疗策略提供思路和实验基础。本研究分四个部分进行。 实验第一部分观察腺病毒载体转染骨髓干细胞(msenchymal stem cells， MSCs)的有效性和外源性基因表达的时相。体外培养大鼠(Sprague Dawley,SD) 骨髓干细胞，用已构建好的Ad5-CMV-GFP真核载体分别转染培养的笫3代(P3) 及第8代(P8)MSCs。流式细胞仪检测转染后第2，4，7及1 O天绿色荧光蛋 白(GFP)的表达率。逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)、Western杂交等方 法检测腺病毒受体(CAR)在各代MSCs中的基因和蛋白质的表达。重组腺病 毒对MSCs的转染率可达800A，P3与P8代MSCs转染率无明显差异(抄统缈)。 转染后2天可见GFP表达，第7天表