16基因表达调控.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 是指可影响自身基因表达活性的特异DNA序列。 ? 启动子 ? 增强子 ? 沉默子 四、 RNA-pol Ⅱ转录起始的调节 （一）顺式作用元件 1. 启动子 真核基因启动子是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，至少包括一个转录起始点以及一个以上的功能组件。 TATA盒 GC盒 CAAT盒 TATA盒: TATAAAA ? 位于-25 ? -30bp ? TFⅡD 结合位点。 ? 控制转录起始的准确性及频率。 GC盒: GGGCGG CAAT盒: GCCAAT ? 位于-30 ? -110bp区域 ? 与相应蛋白因子结合，影响转录效率。 典型的启动子由TAAT盒和CAAT盒和/或GC盒组成，通常具有一个转录起始点及较高的转录活性。 2. 增强子(enhancer) 指远离转录起始点、决定基因的时间、空间特异性、增强启动子转录活性的DNA序列。 3. 沉默子(silencer) 某些基因的负性调节元件，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。 （二）反式作用因子 1. 转录（调节）因子分类（按功能特性） * 基本转录因子(general transcription factors) 是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定三种RNA(mRNA、tRNA及rRNA)转录的类别。 ? 通用的 —— TFⅡD ? 特有的 * 特异转录因子(special transcription factors) 为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达。 转录激活因子:增强子结合蛋白(EBP) 转录抑制因子:沉默子结合蛋白 2. 转录调节因子结构 DNA结合域 转录激活域 TF 蛋白质-蛋白质结合域 （二聚化结构域） 谷氨酰胺富含域 酸性激活域 脯氨酸富含域 最常见的DNA结合域 1. 锌指(zinc finger) C —— Cys H —— His 常结合GC盒 Zn Cys His 2. α-螺旋 常结合CAAT盒 由两个?-螺旋肽链单体，部分相互结合形成的二聚体结构； 每个?-螺旋单体中靠近C-端有一段约30个氨基酸组成的序列，螺旋每旋转两周(约7个氨基酸残基)，就在同一侧面有规律地出现一个疏水性亮氨酸残基； 在单体地N-端，有一段富含碱性氨基酸的亲水区，是DNA结合区域 3 、亮氨酸拉链（leucine zipper） 两个结构相同或相似的单体并列，依赖侧面多个亮氨酸的分子间的疏水作用在C-端形成一个短的卷曲结构，形似拉链。N-端未结合部分相互分开，形成一个倒Y字结构。Y字结构分开的两臂亲水区骑跨在DNA双螺旋的大沟上。 4、螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix) （三）mRNA 转录激活及其调节 polⅡ TFⅡH TAF TFⅡF TAF TAF TFⅡA TFⅡB TBP 真核RNA聚合酶Ⅱ在转录因子帮助下，形成的转录起始复合物 TATA DNA TBP相关因子 TFⅡH 转录起始前复合物 (pre-initiation complex, PIC) 真核基因转录调节是复杂的、多样的 *不同的DNA元件组合可产生多种类型的转录调节方式； *多种转录因子又可结合相同或不同的DNA元件。 *转录因子与DNA元件结合后，对转录激活过程所产生的效果各异，有正性调节或负性调节之分。 什么是小RNA干扰 RNA干扰(RNA interference，缩写为RNAi)是指一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象，其机制是通过阻碍特定基因的翻译或转录来抑制基因表达。当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA时，该mRNA发生降解而导致基因表达沉默。 小干扰RNA 小干扰RNA（Small interfering RNA；siRNA）有时称为短干扰RNA（short interfering RNA）或沉默RNA（silencing RNA），是一个长20到25个核苷酸的双股RNA，在生物学上有许多不同的用途。目前已知siRNA主要参与RNA干扰（RNAi）现象，以带有专一性的方式调节基因的表达。此外，也参与一些与RNAi相关的反应途径，例如抗病毒机制或是染色质结构的改变。不过这些复杂机制的反应途径目前尚未明了。 1. 阻遏蛋白结合于操纵子的 Ａ、启动子 Ｂ、操纵基因