由肽聚糖和磷壁酸组成磷壁酸.PPT

7 化妆品的微生物检验 目录 背景介绍 企业乙为企业甲加工生产若干批批量为20000件的洗面奶，企业乙为保证顺利完成了此次的加工任务， 需要对产品生产的各个环节进行微生物指标的检测，包括成品和生产环境中不同微生物的指标检测。  项目介绍 实施流程 样品前处理 稀释分离 培养基配制步骤 样品稀释 待检测样品稀释度制备 倒板 将洗面奶稀释样品摇匀，用无菌移液管取1 ml的菌液移至无菌培养皿中，然后将融化，凉至50℃左右的培养基，在每个培养皿内各倒入约15 ml，摇匀，凝固，制成平板。 镜检 镜检 镜检 检测结果判断 日化产品质量控制分析检测 * 杭州职业技术学院临江学院 崇德 精技 笃实 创新 日化产品质量控制分析检测 相关内容解读 项目流程 项目介绍 项目背景 项目2：化妆品生产环境中污染菌的的检验 ： 本项目中主要是针对空气、水和操作员的手等三个方面的影响因素进行污染菌的检验。 项目1：洗面奶中细菌总数检验： 本项目主要是针对成品（洗面奶）中细菌总数进行检验，判断此批次产品是否符合国家标准要求。 项目 检测报告 镜检 培养 稀释分离 取样 采集样品 立即登记，编写检验序号 先做微生物检验，再将剩余样品做其它分析 防止微生物的再污染和扩散 固体样品 膏、霜、乳剂半固体状样品 ：包括亲水性的样品和疏水性样品 液体样品：包括水溶性的液体样品和油性液体样品 配制 灭菌 稀释 倒板 按照培养基配方进行培养基的配制 在实验室里用得最多的加热灭菌法是高压蒸汽 灭菌和干热灭菌。 把样品按照 稀释度进行 稀释 将培养基和 待检测样品 进行平板倒 制并进行混 匀 称量 溶化 定容 调PH 分装 包扎 混合倒平板操作法示意图 细菌细胞壁的结构 革兰氏阳性菌细胞壁：由肽聚糖和磷壁酸组成 磷壁酸：占40%。G+菌所特有,其主链由数十个磷酸甘油或磷酸核糖醇组成,有的还有由D—Ala和还原糖组成的侧链。 肽聚糖: 占30~70% ,不同菌种中肽聚糖(肽链)组分不同。 镜检 细菌细胞壁的结构 革兰氏阴性菌细胞壁：分内壁层和外壁层。 内壁层：紧贴胞膜,仅由1—2层肽聚糖分子构成,占细胞壁干重5— 10%,无磷壁酸。 外壁层：位于肽聚糖层的外部。 外：脂多糖; 包括: 中：蛋白质层  内：脂蛋白. 镜检 10% 40%~ 90% 肽聚糖量 11~ 22% 1%~ 4% 脂类量 ﹣ ﹢ 磷壁酸 15%~ 20% 约45% 糖类量 1~ 2层 可达50 层 肽聚糖层 10~ 15nm 21~ 80nm 厚度 革兰阴性菌 革兰阳性菌 细胞壁 G+菌与G-菌细胞壁的区别 镜检 涂片并固定 初染 媒染 复染 脱色 用油镜镜检观察，并根据观察结果判断菌种的性质并记录。 取培养12-24h的菌分别涂片、固定 加草酸铵结晶紫染色剂一滴，染色1分钟 ，并用水洗洗净 加碘液染1分钟，水洗，然后用吸水纸吸干 将载玻片略倾斜，滴加95%酒精脱色（洗至流下的酒精中无紫色时为止），然后水洗 加番红复染，染色30秒，水洗，用吸水纸吸干或烘干 革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法，由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。 阳性菌 阴性菌 镜检 革兰氏染色的原理 镜检 媒染 脱色 初染 结晶紫使菌体着上紫色 碘和结晶紫形成大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内。 酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应。 G+ 菌：细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色。 Gˉ菌：酒精将细胞脱色，细胞无色，蕃红复染后呈红色。 革兰氏染色的原理 显微镜观察 油镜的使用 显微镜维护 基本方法 高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜，在标本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。 观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原。 用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。 调节光亮度 低倍镜观察：粗调、细调 依次再进行中倍、高倍观察 计数 所有稀释度均小于30 两个稀释度均落在30-300 均不在30-300之间，