三种重要海水鱼类胚胎程序化冷冻保存技术研究-水生生物专业论文.docxVIP

三种重要海水鱼类胚胎程序化冷冻保存技术研究摘 三种重要海水鱼类胚胎程序化冷冻保存技术研究 摘 要 鱼类配子和胚胎的冷冻保存对鱼类种质资源保护、低温生物学、遗传育种和 水产养殖业都具有重要的意义。胚胎的冷冻保存是一项系统工作，一个环节处理 不慎，都会导致整个冷冻保存实验的失败。本研究以鲈鱼(LateolabraxJaponica)、 牙鲆(Paralichthys olivaceus)和大菱鲆(Scophthalus wlaxinll$)胚胎为材料，对影响鱼 类胚胎冷冻保存的主要环节分别进行了探讨，并在此基础上进行了三种海水鱼类 胚胎的低温冷冻保存和超低温冷冻保存研究。本研究主要从以下几个方面对海水 鱼类胚胎的冷冻保存进行了探讨： 1．低毒高效的抗冻液是胚胎冷冻保存成功的基础。通过鱼类胚胎在稀释液和 抗冻液中处理一定时间的成活率高低筛选了适宜的稀释液和抗冻剂。鲈鱼尾芽期 胚胎在十种稀释液中分别处理后，DSl组的胚胎成活率最高(95％)，与海水对照 组没有显著差异。鲈鱼和牙鲆胚胎单一抗冻剂的毒性实验结果表明。甲醇 (methan01)、1．2-丙二醇(PG)和二甲基甲酰胺(DMF)的毒性低于其它三种抗 冻剂的毒性。在此基础上，进行的混合抗冻剂的毒性实验结果显示，methanol 和PG按不同比例混合后(百分比浓度计)，具有毒性中和效应，并且牙鲆胚胎在 20％的混合抗冻液PM32中的成活