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當DNA複製完成後,引子再被核酸外切酶(exonuclease)切除,並靠DNA聚合補上一小段之DNA,以完成複製。 岡崎片段 DNA複製時,兩股核苷酸鏈由複製起始點鹼基對間的氫鍵分開,形成一複製叉 DNA聚合酶沿著鑄模股的3向5方向複製出新股(亦即新股的製造方向是由5 →3 ): 其中一股可連續複製 岡崎片段(Okazaki fragment) 另外一股則是先複製出不連續的片段,這種不連續的片段由日本科學家岡崎(Reiji Okazaki, 1930~1975)最先發現 這些岡崎片段最後靠DNA連接酶(Ligase)連接成一完整的新股 DNA的半保留型複製 麥舍生(Matthew Meselson, 1930~)和史塔爾(Franklin Stahl, 1929~) 1958年用同位素15 N追蹤DNA的複製方式 證實DNA是以半保留方式複製 其實驗過程如下: 1. 用含15 N的培養液培養大腸桿菌(大腸桿菌每20分鐘分裂1次) 2. 細菌在此培養液中培養一天後,其DNA所含的氮皆為 15 N(比重最重) 3. 將此含 15 N的細菌放在含有 14 N的培養液中,經過一次分裂,純化其DNA,經由離心方式測得其第一子代的DNA雙股中,一股含 15 N,一股含 14 N 4. 該細菌若繼續培養在 14 N的培養液中,經過二次分裂後,其第二子代的個體中有二分之一DNA兩股皆為14 N(比重最輕);另外二分之一的DNA一股含14 N,另一股含 15 N 半保留型(semiconservative) DNA的複製方式:半保留型(semiconservative) 每個子代的雙股螺旋含有一個舊股和一個新股 想一想 若將大腸桿菌先培養在14 N的培養液中繁殖很多代以後,再將這些細菌培養在 15 N的培養液中,培養兩代以後再純化其DNA,並用離心分離法將不同比重的DNA分層 請畫出純化後DNA在離心管的分布情形 DNA的轉錄 當細胞中按DNA所含的基因訊息合成蛋白質時,在細胞核中先合成RNA 合成RNA的過程和DNA複製的情形相似 構成該基因的DNA兩股先鬆開,RNA聚合酶僅以其中一股作為鑄模,以三磷酸核苷(ATP、CTP、GTP、UTP)為原料 適當的三磷酸核苷分別與鑄模中的含氮鹼基配對: A與U配對 G與C配對 轉錄 合成的核苷酸鏈便是RNA DNA所含的遺傳訊息便抄錄到RNA中 一個基因可以製造出許多相同的mRNA mRNA、rRNA和tRNA皆是經由此法轉錄而成 進階知識 轉錄: 構成基因的兩股核苷酸鏈只有其中一股進行轉錄,但同一條DNA上的不同基因可能由DNA上的不同股進行轉錄,如基因1由紅色股轉錄,而基因2則由藍色股轉錄。 想一想 若有一段DNA的序列為5-GCAACTTACC-3,則根據鑄模股合成的RNA,其序列為何? RNA的修飾 真核生物的遺傳訊息在細胞核中被轉錄至mRNA時,會對mRNA進行許多不同形式的修飾。 5端會被加入甲基鳥糞嘌呤核苷作為5端帽,一方面可保護mRNA不被水解酶分解,同時也指示核糖體附著於此處 在3端(最後轉錄出來的部分)會被加了多個腺嘌呤核,形成多腺嘌呤尾,也具有避免mRNA被分解及協助mRNA轉送至細胞核外的功能 真核生物的細胞核中,被轉錄成的初級mRNA,非編碼區會被切除,編碼區會再被黏合 DNA轉錄出來的初級mRNA很長,含有許多非編碼區的內含子(intron)及編碼區的外顯子(exon) mRNA剪接(mRNA splicing) 當內含子被切除而外顯子接合在一起後,mRNA才能通過核孔至細胞質中進行轉譯工作以合成蛋白質 此種經加工後離開細胞核的mRNA,稱為成熟mRNA(mature mRNA) 13-2.3 基因和DNA 一個DNA分子往往包含數千個基因 基因可說是DNA的一小片段 自二十世紀中葉DNA的結構和遺傳功能被陸續提出後 基因就被視為: 「解開生命奧祕的遺傳密碼」 「主宰生命的程式」 基因:遺傳的基本單位 人體的基因數目尚無定論: 約有二萬五千個基因 分布在46個(23對)染色體上 基因以鹼基排列順序所形成的密碼記載在DNA 不同基因所含的基因訊息不同 鹼基的排列順序必定有所差異 DNA可以間接控制蛋白質合成,再由蛋白質控制遺傳性狀的表現 有些病毒如HIV及流感病毒等,其遺傳物質是由RNA所組成的 第二節 核酸的構造與複製 13-2.1 DNA、RNA的化學組成與構造 查卡夫(Erwin Chargaff, 1905~2002): 核酸: 嘌呤(purine)鹼基 腺嘌呤(adenine;A) 鳥糞嘌呤(guanine;G) 嘧啶(pyrimidine)鹼基 胸腺嘧啶(thymine;T) 胞嘧啶(cytosine;
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