柱前衍生化RP-HPLC法测定L-鸟氨酸盐酸盐的有关-药学与临床研究.PDFVIP

2016 Aug;24(4) 柱前衍生化 RP-HPLC 法测定 L-鸟氨酸盐酸盐的有关物质 张梦悦 ，宋晓妮 ，李曼琳 ，宋 敏 ，杭太俊 * 中国药科大学药物分析教研室，南京 210009 摘 要 目的 ：采 用 9- 芴甲氧羰 酰氯 （FMOC-Cl ）为柱前衍 生化试 剂 ，建立 FMOC-Cl 柱前 衍 生化反相 高效液相 色谱 法测定 L -鸟氨 酸盐 酸盐 的有 关物质 。 方 法 ： 采 用 Agilent Extend C18 （ ， ） 色谱 柱 ，醋 酸 盐缓 冲溶 液 （ ·-1 醋 酸铵 ，冰 醋 酸调 节 至 ） 250 mm ×4.6 mm 5 μm 0.1 mol L pH 5.0 - 乙腈 为流动相 ，梯 度 程 序 洗脱 ，流速 ： · -1 ，检 测 波 长 ： ，柱 温 ： ，测 定 鸟氨 酸 1 mL min 265 nm 35 ℃ L- 盐酸盐 中的有 关物质 。衍 生化方法与条件 ：需衍 生化样 品与 ·-1 硼砂缓 冲液和 · -1 0.05 mol L 8 mg mL 乙腈 溶液 （ ， ）室温反 应 后 正 己烷 萃取 次 ， ·-1 盐酸溶液调 节 FMOC-Cl v/v 1∶3∶3 20 min 2 4 mol L pH 至 3~4 。 结果 ：该 品及其 潜在 的 12 种氨基 酸类有 关物质衍 生物 色谱 分 离度 良好 ；测得各氨基 酸浓 度在 · -1 范 围 内，线性 关 系良好 ， 均 大 于 ，加 样 回收 率和精 密度 结果 均 良好 。 1.0~20 μg mL r 0.9995 结论 ：该方 法专属性好 、准确度 高 ，适 用于该 品有 关物质 的检 测 。 关键词 鸟氨 酸盐酸盐 ；有 关物质 ； 芴甲氧羰 酰氯 ；柱前衍 生化 ；反相 高效液相 色谱 法 L- 9- 中图分 类号 文献标 志码 文章编 号 （ ） R927.11 A 1673-7806 2016 04-284-05 鸟 氨 酸 （Ornithine ）是 非 蛋 白质 氨基 酸 ，存 在 于 速 度 足 够 快 ，对 反 应 的条 件 要 求 较 高 ，需 要 专 门 的 身体组织 和蛋 白质含量 丰 富 的食 物 中 ， 如 肉类 、鱼 氨基 酸 分 析 仪 ，与 HPLC 法 相 比 ，其 分 离 度 和 准 确 类