拉米夫定的结构确证、原料药及片剂的质量控制及其在大鼠体内的药代动力学和生物等效性研究-药物分析专业论文.docxVIP

拉米夫定的结构确证、原料药及片剖的质量控制及其鹌，大鼠体内韵药代动力学和生物等效性研究拉米夫定的结构确证、原料药及片剂的质量控制 拉米夫定的结构确证、原料药及片剖的质量控制及其鹌，大鼠体内韵药代动力学和生物等效性研究 拉米夫定的结构确证、原料药及片剂的质量控制 及其在大鼠体内的药代动力学和生物等效性研究 硕士研究生：赵曦 导师：张丹教授 摘 要 病毒是一种非细胞形态的微生物，它的主要特点是：体积小，结构简单， 变异快，感染力强，感染人体后可致严重病变。特别是乙型肝炎病毒(HBV) 和艾滋病病毒(HIV)已经对人类的健康构成了重大威胁，成为当今危害人类身 心健康的严重疾病。因此，对抗病毒药物的研究开发日益显现出其必要性与紧 迫性，成为当前国内外研究的热点之一。拉米夫定(Lamivudine，3TC)是一种 高效、高选择性、使用安全、副作用低的抗病毒药物，临床主要用于乙型肝炎 和艾滋病的治疗并取得了较满意的疗效。拉米夫定抗病毒的作用机制在于：抑 制前基因组RNA反转录为负链DNA，阻断新合成HBV．DNA或HIV—DNA链 化，从而有效抑制乙肝病毒和艾滋病病毒的复制，起到杀灭病毒的作用。 本文采用NMR、MS、IR、uV并结合理化性质对所研发的拉米夫定进行了 结构确证，证实本品为2。，3‘．双脱氧一3一硫代胞嘧啶。同时，经热分析、元素分析 等证实，本品具有较高纯度，符合原料药纯度要求。 USP26仅收载了拉米夫定原料药的质量标准，而中国药典对其原料药和制 剂的质量标准均未收载。本文对拉米夫定原料药及其片剂的质量控制方法进行 了较深入研究。根据拉米夫定的理化性质与结构特征建立了理化鉴别、杂质检 查以及含量测定方法。测得拉米夫定的吸收系数陋：兰1270rim)】为421．5，临界相 对湿度为84．26％。建立了对照品含量测定的非水滴定法，原料药及片剂含量测 定和有关物质检查的RP-HPLC法。选择cl B柱(250x4．6mm，10岬)，甲醇 一20mmol／L磷酸盐缓冲液(9：91，用氢氧化钠调节pH值至6．8+0，1)为流动相， 在270nto处测定。在此色谱条件下， 拉米夫定在浓度为5,0～400．0“∥ml范围 内，峰面积与其浓度线性关系良好(，=O．9999)，检测限为Ing(S／N=3)，中间精 密度试验RSD_I．O％，重复性试验RSD为0．19％∽=6)，加样回收率为99．9％， 有关物质检查限度为1．O％。同时，本文还建立了拉米夫定中右旋异构体检查的 四川I大学硕士学位论文手性固定相HPLC法。本研究工作为拉米夫定原料药及片剂的质量控制提供了 四川I大学硕士学位论文 手性固定相HPLC法。本研究工作为拉米夫定原料药及片剂的质量控制提供了 准确、简便、可行的分析方法。 为了进一步考察自制拉米夫定片-9市售进口产品质量的吻合性，本文进行 了拉米夫定片在大鼠体内的药代动力学及生物等效性研究。建立了甲醇沉淀蛋 白的血浆样品预处理方法，采用RP—HPLC法测定大鼠血浆中拉米夫定浓度。分 析柱为Hypersil C18柱(250×4．6mm，10p．m)，在270urn处测定。在此色谱条件 F，拉米夫定在0．05～20．00m∥L浓度范围内，线性关系良好(r=0．9998)，检 测限均为lng(SfN=3)；去蛋白后药物释出率为98．7％，空白加样回收率为 101．4％，样品加样回收率为99．5％；日内和曰间精密度的RSD均』6．O％。本法 可用于拉米夫定在大鼠体内的药代动力学及生物等效性研究。 应用所建分析方法进行了12只大鼠灌胃给药后的药代动力学研究。其中6 只大鼠给予自制片剂，另6只给予市售进口片剂(贺普丁)，比较两种片剂在大 鼠体内是否具有生物等效性。试验结果表明，拉米夫定在大鼠体内过程符合二 室模型。其自制片剂的主要药代动力学参数为：药时曲线下面积(AUCo+，)为 9．4872+0．7352(m∥L)．h；(AUCo．。)为14．4669+1．6987(mg／L)-h_峰浓度(C。。) 为2．5033+-0．2694m∥L；达峰时问(Tm。)为O．9889_+0．0629h；吸收半衰期(tI，2， k。)为0．253210．1867 h；分布半衰01／2，。)为2．1114+-0．5421 h；消除半衰期(tl／2 D) 为l 1 8399_+2．7824 h；清除率(cL)为1．276 1-+0，5069 m∥kg／h(m∥L)；表观分布 容积(v／F)为20．7360+-5．2227(mgmg)，(mg／L)。市售进口片剂(贺普丁)的 主要药代动力学参数为：药时曲线下面积(AUCo．。)为10．2355+-1．0954(m∥L) 。h；(AUCo。)为16．1336_+2．5803(m班)．h；峰浓度(C。ax)