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学位(毕业)论文作者亲笔签名: 日期: 指导教师亲笔签名: 日期:
目 录 摘要I
ABSTRACT III
缩略词 V
1 前言 1
1.1 果实颜色的形成1
1.2 果实的风味和贮藏3
1.3 食物过敏 4
1.4 本研究的目的和意义5
2 两种枇杷果肉生理指标的测定5
2.1 材料与方法 5
2.1.1 试验材料5
2.1.2 类胡萝卜素含量的测定5
2.1.3 可溶性糖含量的测定5
2.1.4 可滴定酸含量的测定[38] 6
2.1.5 多酚氧化酶(PPO)活力测定[39] 6
2.1.6 抗坏血酸过氧化物酶(APX)活力测定[40] 6
2.1.7 超氧化物歧化酶(SOD)活力测定[41] 6
2.1.8 肉桂醇脱氢酶(CAD)活性的测定[42] 6
2.2 结果与分析 7
2.2.1 类胡萝卜素在两个品种枇杷果肉的含量 7
2.2.2 可溶性糖和可滴定酸在两个品种枇杷果肉的含量 7
2.2.3 多酚氧化酶(PPO)测定结果及分析 8
2.2.4 抗坏血酸过氧化物酶(APX)和超氧化物歧化酶(SOD)活力测定及分析 9
2.2.5 肉桂醇脱氢酶(CAD)活性的测定结果及分析 10
3 枇杷果肉差异蛋白质组研究12
3.1 试验材料 12
3.2 试验方法 12
3.2.1 蛋白质的提取12
3.2.2 蛋白的裂解12
3.2.3 含量的测定13
3.2.4 双向电泳分析13
3.2.4.1 胶条的水化13
3.2.4.2 胶条的转移与电泳13
3.2.4.3 胶条平衡13
3.2.4.4 SDS电泳 14
3.2.4.5 染色14
3.2.5 图像的扫描及软件分析14
3.2.6 差异蛋白质谱鉴定及数据库检索 14
3.3 统计分析 14
3.4 结果与分析 15
3.4.1 成熟期‘黄金块’和‘太城白蜜’枇杷果肉差异蛋白质组分析 15
3.4.2 蛋白质功能分类34
3.5 讨 论 35
3.5.1 胁迫和防御相关的蛋白35
3.5.2 物质与能量代谢相关的蛋白37
3.5.3 次级代谢相关蛋白38
3.5.4 信号转导相关蛋白39
3.5.5 过敏原蛋白40
4 Western blot 分析及 MAL 基因克隆 40
4.1 HSP70 蛋白 Western blot 分析 40
4.2 Mal d 1 基因的克隆 40
4.2.1 枇杷总 RNA 提取 41
4.2.2.Mal d 1 基因中间片段的获得 41
4.2.3 结果分析42
5 小结 44
致谢 54
摘要
枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.),是原产于我国的一种亚热带水果。根据果实 的颜色,一般将枇杷分为两类:红肉和白肉枇杷。一般情况下,与红肉枇杷相比, 白肉枇杷的果肉色泽发白,肉质更加细腻多汁,香甜适口,贮藏期较短。而红肉 枇杷的果肉肉质偏黄或红,口感较差,但贮藏期更长。
在本次实验中我们选取了成熟期两个品种的枇杷的果实:‘黄金块’ (红肉) 枇杷和‘太城白蜜’ (白肉)枇杷作为材料,研究了它们的果肉在成熟期的一些 生理指标和蛋白质组表达差异特征。
1.本文测定了类胡萝卜素、可溶性糖和可滴定酸的含量。结果表明,‘黄金 块’枇杷可溶性糖含量大约是 62mg/g,‘太城白蜜‘枇杷大约是 97mg/g。‘黄金 块’枇杷可滴定酸度为 0.14mmol/100g,‘太城白蜜’枇杷为 0.04mmol/100g。‘黄 金块’枇
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