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二、基本原理 酸的产生可利用指示剂来断定。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫[Ph5.2(黄色)-6.8(紫色)],当发酵产酸时,可使培养基由紫色变为黄色。 气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。 四、操作步骤 1、编号 用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名。 2、接种 取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3支,按编号1支接种大肠杆菌,另1支接种普通变形杆菌,第3支不接种,作为对照。另取乳糖发酵培养基试管3支,同样1支接种大肠杆菌,1支接种普通变形杆菌,第3支不接种,作为对照。 3.将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置37℃温室中培养24小时。 注意事项: 接种后应轻轻摇动试管,使其均匀,防止倒置的小管进入气泡。否则会造成假象,得出错误答案。 观察结果: 观察结果时,看各管颜色变化及杜氏小管有无气泡。 产酸产气用“⊕”表示; 只产酸不产气用“+”表示; 不产酸也不产气用“—”表示。 * * 实验四 糖发酵实验 一、目的要求 1.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。 2.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 二、基本原理 糖发酵试验是最常用的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖的能力上有很大的差异,有些细菌能分解某种糖并产酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢、甲烷、二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气;伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气,不能分解乳糖;普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气,不能分解乳糖。 三、实验材料 1.大肠杆菌,普通变形杆菌( Proteus vulgaris)斜面各1支; 2.盛有葡萄糖发酵培养基的试管和乳糖发酵培养基的试管各3支(内装有倒置的德汉氏小管),试管架,接种环等。 图1 糖类发酵试验 *
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