辣椒疫病生物防治的研究-生物化学与分子生物学专业论文.docx

兰州大学硕士学位论文摘要 兰州大学硕士学位论文 摘要 1生防菌的分离、筛选及其生物学特性的研究 本试验从甘肃各地采集的179份土样中分离得至JJ481株细菌，对10种以上病原真菌有抑 制作用的细菌有89株；用抑菌带一定殖力双重测定法，从中筛选出3株在辣椒根际定殖能力最 好、抑制辣椒疫霉菌能力较强的生防菌F一152、Q．28；fHO一39。 生防菌生物学特性试验结果表明，3菌株的最适培养时间为20-28h；最适培养温度为 30～37*(2；最适培养液PH为6～8：通气量对3菌株的生长影响不明显。F一152生长的最适NaCL 浓度为0．17％，蔗糖浓度为9％；Q一28羊no．39生长的最适NaCL浓度为l 5％，蔗糖浓度为3％。 2生防菌的鉴定 经培养性状和形态学特征的观察及生理生化特征的测定，初步鉴定F一152、Q一28和 O一39菌株均为多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)，但3菌株的培养性状和生理生化 特征各有不同。F．152和O．39菌株的16S rDNA序列分析结果表明，它们分别与GenBank 中已报道的Paenibacilluspolymyxa 16S rDNA序列(登录号：AY302439和AY359622)有 99％的相似性，由系统树可见F．152与O一39的亲缘关系较远，证实了形态特征与生理生化 鉴定结果。F．152和O一39菌株保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号分别为 M 206041和M206042。 3．生防菌在辣椒根部及根围土中的定殖动态研究 本试验结果表明，生防菌高浓度接种在辣椒根部及根围土中的定殖浓度始终高于低浓 度接种的定殖密度，高浓度接种F．152、Q一28和O一39的定殖消长动态都是先降后升再降并 逐渐保持稳定，到60天时，定殖密度仍可保持在3．5个数量级；接种辣椒疫霉菌对F-152 的定殖影响较大，O．39次之，对Q一28的定殖影响不太明显；先接种生防菌后接种辣椒疫霉 菌对生防菌的定殖影响较小，相反则影响较大。 4生防菌室内抑菌控病效果研究 抑菌试验结果表明，3菌株的无菌滤液对辣椒疫霉菌的抑制率较低，但灭菌培养液的抑 菌率有明显提高。3株生防菌浸种对辣椒种子发芽率都有明显的提高。温室试验结果表明， 采用培养液灌根接种生防菌，以先接种生防菌，5天后接种病原菌，2天后再接种生防菌， 待发病后再接种生防菌的方法处理，可得到最好的防治效果，即O一39、Q一28和F-152培养 液28天时的防治效果分别为90 63％、88 40％和67．04％。 5 F-152与B一21原生质体融合选育多功能生防菌 通过对能有效定殖于辣椒根际的多粘类芽孢杆菌F．152(Rif、Em‘)菌株与无菌滤液能 兰卅『大学硕士学位论文明显抑制辣椒疫霉菌的芽孢杆菌B．21(Rif、Em+)菌株进行原生质体融合，初步得出F-152 兰卅『大学硕士学位论文 明显抑制辣椒疫霉菌的芽孢杆菌B．21(Rif、Em+)菌株进行原生质体融合，初步得出F-152 和B-21原生质体制备，再生及进行融合的部分较好条件。通过对55株融合子的筛选，从 中筛选出3株其无菌滤液对辣椒疫霉菌的抑制率介于两亲本之间的融合子，融合子的定殖 力及防治效果还有待进一步探讨。 关键词：辣椒疫病 多粘类芽孢杆菌 生物防治 筛选 鉴定定殖原生质体融合 兰州大学硕士学位论文ABSTRACT 兰州大学硕士学位论文 ABSTRACT 1 Isolation、screening ofbiological baceria and studing oftheir biological characteristic In our study,481 bacterial strains were isolated from 179 soil samples collected from fields in GanSu，from which 89 bacterial strains antagonistic highly against 16 strains of plant pathogenic fungal From the isolates 3ff一152、Q一28 and O-39)strains with obvious inhibiting activity to Phytophthora capsici and the root-colonizing density are highest were screened as the biocontrol bacteria by using the method of the inhibiting zones combined with root-colonizing