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第一章 绪论
第一节 食品质量与安全的现状及现代食品检测技术的主要内容 一、食品质量安全现状 二、现代食品检测技术的内容 计算机视觉技术; 现代仪器分析技术;食品物性的力学、声学、电学检测技 术;电子传感检测技术;生物传感检测技术;核酸探针检测技术;PCR 基因扩 增技术;免疫学检测技术。 第二节 现代食品检测技术的主要特点 一、食品检测技术更注重实用性和精确性 1. 微型化 2. 低能耗化 3. 功能专用化 4. 多维化 5. 一体化 6. 成像化 二、食品检测技术中大量应用生物技术领域研究成果 三、食品检测技术与计算机技术结合越来越紧密 四、食品检测中不断应用其他领域新技术 五、大力发展实时在线、无损检测技术
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第二章 色谱法原理
色谱法概述 色谱理论基础 色谱定性定量方法 色谱法概述 色谱的发现 俄国植物学家茨维特( 1872–1919 ),1903 年使用的色谱分离装置 色谱法的定义: 色谱法是一种分离方法,它利用物质在两相中分配系数的微小差异进行分 离。当两相做相对移动时,使被测物质在两相之间进行多次分配,这样原来微小 差异产生了很大的效果,使各组分分离,以达到分离分析及测定一些物理化学常 数的目的。 色谱的发展 色谱的发展 1 柱色谱 纸色谱 色谱的发展 2 薄层色谱 薄层电泳 色谱的发展 3 气相色谱 色谱的发展 4 高效液相色谱 色谱的发展总结 20 世纪中期,大量采用一些经典的分离方法:沉淀、蒸馏和萃取。 50 年代,色谱发展最快。 1937-1972 年,35 年中有 12 个 Nobel 奖是有关色谱研究的! 色谱的分类 按两相的物理状态分类 气相色谱:气液色谱(GLC) 、气固色谱(GSC) 液相色谱:液液色谱(LLC) 、液固色谱(LSC) 超临界流体色谱 化学键合相色谱 按分离机理分类 吸附色谱 分配色谱
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离子交换色谱 尺寸排阻色谱 亲和色谱 按固定相的外形分类 柱色谱 平板色谱:薄层色谱、纸色谱 色谱的特点 分离效率高、灵敏度高、分析速度快、应用范围广 色谱的作用: 色谱的作用:有机化合物分离和定量分析 色谱理论基础 色谱流出曲线与术语 色谱流出曲线的数学描述 如果进样量很小, 浓度很低, 在吸附等温线的线性范围内, 色谱峰如果对称, 可用 Gauss 正态分布函数表示: = C0 ? exp[? 1 ( t ? t r ) 2 ] C 2 σ σ 2π 式中:C—不同时间 t 时某物质的浓度,C0—进样浓度,tr—保留时间,σ— 标准偏差。 当色谱峰为非正态分布时,可按正态分布函数加指数衰减函数构建关系式。
1. 流出曲线和色谱峰 色谱流出曲线:试样中各组分经色谱柱分离后,按先后次序经过检测器时,检测器就将 流动相中各组分浓度变化转变为相应的电信号,由记录仪所记录下的信号-时间曲线或信号流动相体积曲线,也称色谱图。 色谱峰: 当组分随流动相进入检测器时, 其响应信号大小随时间变化所形成的峰形曲线。 基线: 在色谱操作条件下, 仅有流动相通过监测器时, 由记录仪得到的信号-时间曲线。 基线漂移:基线随时间定向缓慢地变化。 峰高:峰的顶点到峰底之间的垂直距离。 峰面积:峰与峰底之间的面积。 2. 保留值 (1)时间表示的保留值 保留时间(tR) :组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间。 死时间(tM) :不与固定相作用的气体(如空气)的保留时间。 调整保留时间(t’R) :某组份的保留时间扣除死时间, 即 t’ R= tR-tM 。 (2)用体积表示的保留值 保留体积(VR) :从进样开始到被测组份在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相体积。 VR = tR×F0,F0 为流动相流速(L/min) 死体积(VM) :死时间内流动相流经色谱柱的体积。VM = tM×F0 调整保留体积(V’ R) :某组份的保留体积扣除死体积。V’ R= VR-VM
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(3)相对保留值 r21 组分 2 与组分 1 调整保留值之比。r21 = t’ R2 / t’R1= V’R2 / V’ R1 (4)选择因子(α ) α= t’ R2 / t’R1,式中 t’R2 为后出峰的调整保留时间,α总是大于 1 的。 3. 区域宽度 用来衡量色谱峰宽度的参数。有三种表示方法:
①标准偏差(σ):即 0.607 倍峰高处色谱峰宽度的一半。 W ? 1.7W1 / 2 ②半峰宽(W1/2):色谱峰高一半处的宽度 W1/2 =2.354 σ ③峰底宽(W):通过峰两侧的拐点做切线与峰底相交的宽度 W =4σ
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