课件：夏建川生物治疗及在临床肿瘤治疗中的应用演示课件.ppt

THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * 从手术后肾癌组织中分离纯化肾癌细胞 未纯化的人肾癌细胞 纯化后的肾癌细胞 贴壁生长的肾癌细胞 从术后卵巢癌组织中分离纯化卵巢癌细胞 未纯化的人卵巢癌细胞 纯化的人卵巢癌细胞 贴壁生长的卵巢癌细胞 树突状细胞疫苗在实体瘤治疗中的策略（1） 抽病人50ml-60ml外周血 分离单核细胞，体外诱导DC细胞 DC细胞负载自体肿瘤抗原，通过静脉回输给病人或经皮下注射 经肿瘤抗原负载DC细胞能刺激自体T细胞 产生强烈的抗肿瘤免疫应答。 树突状细胞疫苗在实体瘤治疗中的策略（2） 抽病人50ml-60ml外周血 分离单核细胞，体外诱导DC细胞 DC细胞负载自体肿瘤抗原并与自体的淋巴细胞混合，刺激自体T细胞产生细胞毒性T淋巴细胞 将这些细胞毒性T淋巴细胞通过静脉回输给病人 直接杀伤肿瘤肿瘤细胞 （2）树突状细胞与肿瘤细胞融合 疫苗诱导机体产生主动抗肿瘤免疫 树突状细胞表达高水平的共刺激分子，能在体内外直接激活初始T细胞，调节免疫应答的起始，促进T辅助细胞和细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxical T lymphocyte CTL)的生成，也能促进B细胞生成抗体。 近年来，随着对DC摄取、递呈抗原机理的不断认识, DC培养方法的不断成熟和完善，针对肿瘤的免疫原性弱的免疫特点而设计的DC/肿瘤融合细胞疫苗已成为该领域的热点之一。? 肿瘤细胞表面抗原的多样性 肿瘤细胞模式图 肿瘤抗原免疫原性弱，难以激活有效的机体免疫 人乳腺癌细胞电镜扫描图 分化成熟的DC模式图 Strategy of Fusion Fusion Dendritic cell MMT tumor cell 50% PEG FC/MMT DF3/MUC1 MHC II B7 ICAM MHC I DC与肿瘤细胞融合 自体DC/肿瘤融合细胞疫苗 原代肿瘤细胞 成熟DC细胞 自体DC/肿瘤融合细胞疫苗 PBMNC（50-60ml） 融合 TNFα, IL-4 GM-CSF 肿瘤细胞纯化技术 术后肿瘤组织 自体DC/肿瘤融合细胞疫苗治疗策略（1） 抽病人50ml-60ml外周血 分离单核细胞，体外诱导DC细胞 DC/融合细胞疫苗经皮下注射 DC/融合细胞疫苗能刺激自体T细胞 诱导产生的抗肿瘤免疫应答。 制备DC/肿瘤融合细胞疫苗 自体DC/肿瘤融合细胞疫苗治疗策略（2） 抽病人50ml-60ml外周血 分离单核细胞，体外诱导DC细胞 DC/肿瘤融合细胞与淋巴细胞混合，刺激产生细胞毒性T淋巴细胞 细胞毒性T淋巴细胞通过静脉回输给病人 直接杀伤肿瘤细胞 制备DC/肿瘤融合细胞疫苗 （1）抗原激活的杀伤细胞(TAK)； （2）肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）； （3）细胞毒性T淋巴细胞(CTL)； （4）激活的杀伤性单核细胞(AKM)； （5）自然杀伤细胞(NK)； （6）细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)。 2、肿瘤过继性细胞免疫治疗 向肿瘤患者输入具有抗肿瘤活性的免疫细胞，直接杀伤肿瘤或激发机体抗肿瘤免疫效应，从而达到治疗肿瘤的目的。主要包括以下几类： 过继性细胞免疫治疗的过程 （1）CIK细胞治疗肿瘤 “CIK细胞” 是将人的外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子（如抗CD3McAb, IL-2, IFN-γ, IL-1α等）共同培养一段时间后获得的一群异质细胞，由于该种细胞同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子，故又被称为NK细胞样T淋巴细胞，兼具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点。目前，CIK细胞被认为是新一代抗肿瘤过继免疫治疗的方案之一. 自体CIK细胞的制备 PBMNC 0.5-3×107（50ml） 24 个175cm的培养瓶 IFNγ Il-2 CD3 mAb IL 1α 12-14 days 1~1.5×1010 经淋巴细胞亚群检测，CIK细胞的中CD3CD56双阳性细胞的数量达到42.35%， （2）自体DC细胞激活的CIK细胞治疗肿瘤 通过体外诱导有功能的自体DC细胞，将这种有功能的自体DC细胞激活自体CIK细胞，产生一种更强的抗肿瘤的效应细胞（DC-CIK细胞），从而发挥其抗肿瘤作用。实验证实，DC-CIK细胞能促进IL-12和INF-γ的分泌，提高细胞毒性，增强对肿瘤细胞的杀伤作用， 自体DC-CIK 细胞的制备 CIK细胞 成熟DC细胞 DC细胞刺激的CIK细胞（ 1~1.5×1010 ） PBMNC 0.5-3×107（50ml） 共培养 TNFα, IL-4 GM-CSF IF