六味地黄丸与桂附地黄丸对放化疗所致骨髓抑制小鼠造血影响的比较分析-中西医结合基础专业论文.docxVIP

成都中医药大学硕士学位论文 成都中医药大学硕士学位论文 8 8 LDPs 及 GDPs 对放化疗所致骨髓抑制 小鼠造血影响的比较研究 摘 要 研究目的： 放、化疗是临床肿瘤治疗及预防术后复发的主要手段[1]，而骨髓抑制又是放、 化疗的主要副作用[2]，骨髓抑制后，患者主要表现为血细胞减少，免疫力低下， 贫血等，给疾病的康复造成不利的影响。据报道，放、疗后病人多表现出低热[3]， 腰酸膝软，毛发脱落[4]，手足心热[5]，口咽干燥、脉细数[6]，或面色苍白，乏力， 脉细弱等虚热或血虚症状，重则脾肾阳虚[7]，符合中医学肾阴亏虚的表现，由于 阴阳互根互用，阴虚则阳无所依，日久不愈，必然导致阳虚。中医理论认为，肾 主骨生髓，主藏精，主生长发育，为先天之本，元阴元阳之根。《张氏医通》言 “血之源头在乎肾”，《景岳全书》曰“精足则血足”等。可见，精髓是化生血液 的基本物质，赋予后天之根本。由此可知，一旦肾虚，阴阳之根乏源，精髓枯竭， 即使有后天补养，也必然导致血液生化受碍，出现血虚之征。目前，通过补肾促 进骨髓抑制小鼠造血功能恢复的实验研究报道较少。本实验拟选用六味地黄丸 （Liuwei Dihuang pills,LDPs）和桂附地黄丸（Guifu Dihuang pills,GDPs）作为滋 阴补肾和补肾助阳的代表方，探讨补肾对促进放化疗所致骨髓抑制小鼠造血功能 恢复的影响，进一步了解补肾生血的作用机理，以丰富中医理论的科学内涵。 研究方法： 通过放化疗建立骨髓抑制小鼠模型，观察 LDPs 和 GDPs 对骨髓抑制小鼠外 周血象的影响；通过造血祖细胞培养，观察两方对骨髓抑制小鼠三系造血祖细胞 增殖分化的影响；通过流式细胞术，了解两方对骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期及凋 亡率的影响；通过检测外周血 SOD、GSH-PX 活性和 MDA 含量，了解放化疗所 致骨髓抑制小鼠抗氧化酶活性及自由基水平变化，并观察两方对骨髓抑制小鼠抗 氧化能力的影响。 PAGE PAGE 10 研究结果： 1、外观与体重：造模完成后，实验组小鼠毛发竖立，体重减轻，体型瘦小， 大多数小鼠活动烦躁易怒（易咬人），皮温较正常组高，饮水量增加；空白组小 鼠毛发光滑，表现比较温顺、安静，体型稍大。经统计学分析，用药 7 天后，LDPs 和 GDPs 高剂量组小鼠体重显著增加，与模型组比较均具有统计学意义，与空白 组比较无显著差异。 2、外周血象：造模后，小鼠外周血 RBC、HGB、WBC、PLT 均显著降低， LDPs 和 GDPs 对外周血象的恢复均有不同的促进作用。其中 LDPs 对 RBC、HGB、 PLT 的作用较 GDPs 明显，而 GDPs 对于 WBC 的作用较 LDPs 明显，中、高剂量 组都能使白细胞计数恢复到正常值水平。 3、骨髓造血祖细胞培养：LDPs 和 GDPs 中、高剂量组均能增加红系、粒系、 巨核系细胞集落数，并具有剂量依赖性。其中 LDPs 对红系和巨核系作用尤为显 著，而 GDPs 对粒系的作用更为明显。 4、细胞周期检测：放化疗可引起细胞周期 G0/G1 阻滞，LDPs 与 GDPs 均能 提高骨髓有核细胞的 S 期和 G2/M 比例，显著降低细胞凋亡率。其中 GDPs 主要 作用于 S 期，LDPs 主要作用于 G2/M 期；表明 LDPs 与 GDPs 能促进骨髓有核细 胞的分裂增殖并抑制其凋亡。 5、抗氧化作用：放化疗所致骨髓抑制小鼠全血中 SOD 和 GSH-PX 活性均显 著降低，MDA 含量升高。LDPs 和 GDPs 能够明显提高骨髓抑制小鼠全血中 SOD 和 GSH-PX 活性，降低 MDA 含量。但 GDPs 对升高 GSH-PX 活性作用较 LDPs 组明显，而 LDPs 升高 SOD 的作用较 GDPs 组明显，提示了两方在抗氧化方面可 能存在不同的机制。 研究结论： 1、LDPs 和 GDPs 都能够不同程度改善骨髓抑制小鼠的体重及外周血象，但 GDPs 对白细胞的作用明显优于 LDPs。 2、LDPs 和 GDPs 都能够增加骨髓有核细胞数，并促进三系造血祖细胞的增 殖，增加各系造血祖细胞的细胞集落数，促进造血功能恢复。 3、放化疗可使骨髓抑制小鼠细胞周期出现 G0/G1 阻滞，LDPs 及 GDPs 能够 促进骨髓有核细胞的分裂增殖，增加 S 期和 G2/M 期细胞比例，同时降低细胞凋 亡率，但是，它们作用的周期有所不同。 4、放化疗可导致体内自由基的产生，LDPs 和 GDPs 能够通过提高抗氧化酶 活性，减少放化疗引起的对造血系统的自由基损伤，从而促进造血恢复。 综上所述，通过本实验的研究，提示通过补肾，或滋阴填精，或温助肾阳， 均能填精充髓，使精血生发有源，从而达到补血的效果。 关键词：骨髓抑制；六味