细胞培养创新技术简介.pptVIP

第十三章 细胞培养技术 cell culture 细胞培养技术发展简史 为何要进行细胞培养 细胞培养是很多实验的基础。 在细胞生物学研究中，细胞是研究的对象； 在分子生物学的功能研究中，细胞是研究分子功能的载体。 细胞培养技术非常基础，是实验操作的基本功之一，所以很重要。 怎样进行细胞培养 1 准备工作: 包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试。 2 取材: 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞，经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器皿中，这一过程称为取材。 3 培养: 将组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。细胞培养应先进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入含培养基的培养器皿。 4 冻存及复苏： 为了保存细胞要将细胞冻存。冻存的温度为液氮的温度－196℃，将细胞收集至冻存管,加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存保存于液氮中，在液氮中细胞保存的时间几乎是无限的。 冻存细胞要快速融化即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在1分钟内迅速融解，离心去除冻存培养基，将细胞直接加入完全生长培养基中。 5 常用仪器设备: 无菌室,超净工作台, 蒸气消毒锅, 培养器具，CO2培养箱,恒温水浴锅,倒置显微镜