喹赛多在鲤体内的药物动力学及残留的研究-水产养殖专业论文.docxVIP

华中农业大学2003屠硕士研究生学位论文摘要 华中农业大学2003屠硕士研究生学位论文 摘要 喹赛多在鲤体内的药物动力学及残留的研究 研究生殷居易” 导师吴志新”副教授袁宗辉”教授 (”毕率农业大学水产学院．”农业部★晶安全评价重点开放实验室．农业部兽药残害检潞基准实验室，溜 北，武汉430070，中华人民共和嗣) 以反相高效液相色谱(RP—HPLC)法为定性和定量手段，研究喹嗯啉类新药喹赛 多在鲤(Cyprinus cazpio L．)体内的单剂量静脉注射和口灌给药后的药物动力学过 程，以及药饲后组织中残留消除规律。静脉注射和口灌给药后，分别在0．08～48 h 内定时从鲤静脉采血，迅速分离血浆，于一20C避光保存。血浆样品于测定前以甲 醇去蛋白处理，取上清液作HPLC分析测定。实验数据处理采用MillemlliUm32分析系 统，选用ODS—C．。分析柱(150×4．6 mm，5 m)，以甲醇：水(15：85／V：V)为流 动相，流速0．9 mL／min，检测波长305 nln。喹赛多(脱二氧喹赛多)对照品的最低 检测限(LOD)0．005(0．01)增／ⅢL，最低可定量限(LOQ)0．01(0．02)pg／mL，浓度 在0．0l～1．0(0．02～2．0)¨g／mL时与峰面积呈良好线性关系，线性方程为C=6× 10A一0．0019，r=O．9996(c=11．78X 10’A+0．0119，r=O．9989)。血浆中喹赛多(脱 二氧喹赛多)浓度在0．015、0．125，1．0瞻／mL(0．03、0．25、2．O”g／mL)时，日 内、日间变异系数分别5％(10％)和lO％(15％)，平均回收率85％(80．0 ％)。静注给药后血药浓度一时间数据符合无吸收三室开放模型，药物动力学方程为 C=I L．420lel““+o．4926e“””+0．0736e ““。其主要药动学参数为：吸收速率 常数(K。)8．065 h，吸收半衰期(k。)0．086 h，中央室表观分布容积V。)186．86 mL／kg wb：消除速率常数(K。)O．8327 h，半衰期(T*p)0．832 h；残留后相消除 速率常数(K。)0．0548 h～，药时曲线下面积(AUC)3，35(灶g／mL)h。口灌给药后 血药浓度一时间数据符合一级吸收一室开放模型，药物动力学方程为 C=O．1371×(e～ 一e‘”1)。其主要药动学参数为：一级吸收速率常数(IC)0．3099 h～，吸收半衰期(T。)2．24 h；一级消除速率常数(I(．)0．0823 h～，消除半衰期(T。) 8．42h，表观清除率(CL。)0．597 L／h。药物在血液中达峰时间(T。．)5．83 h，最 大血药浓度(C．。)0．0623№／mL。 以含喹赛多100 mg／kg剂量，连续药饲投喂鲤12 w，检测其在组织中的残留。 于末次药饲投喂后0(当天)、2、4、5、6、8、lO、15、20、25、30 d随机取样五 尾鱼，收集肝脏、肌肉和皮，一20C避光保存。测定时，室温下解冻，每个样品以 不同的方法预处理后进行分析酒定：～份样品以常规方法预处理，经匀浆、提取、 脱脂后作HPLC检测：另一份样品以碱水解、SPE柱净化后再作HPLc检测。常规方法 预处理样品，同时测定喹赛多．喹嚯啉-2-羧酸，脱二氧喹赛多三种化合物。碱水 解方法预处理样品．测定喹嗯啉一2一羧酸，该处理可将结合及游离态的喹嗯琳一2一羧 喹赛多在鲤体内的药物动力学及残留的研究酸全部从组织中释放出来，并作为靶代谢物进行检测，以了解鲤的肌肉、皮以及肝 喹赛多在鲤体内的药物动力学及残留的研究 酸全部从组织中释放出来，并作为靶代谢物进行检测，以了解鲤的肌肉、皮以及肝 脏组织中药物残留情况，并据此定出休药期。常规方法预处理中喹赛多、喹嗯琳一2一 羧酸，脱二氧喹赛多三种化合物的最低检测限分别为0．005、0．01、0．01№／g，最 低可信定量限0．01、0．02，0．02№／g，日内、日闻变异系数分别10％和t5％ (n=5)，回收率在70～90％之间。肌肉中喹嗯啉一2一羧酸的含量最高，消除最慢。水 解预处理方法中喹嗯啉一2一羧酸在鲤组织中的最低检测限为0．01魄／g，最低可信定 量限0．02瞻／g。组织中喹嗯啉一2一羧酸的平均回收率为81．8+2．1％，13内及日间 变异系数分别j％和10％(n=5)。 实验结果显示：喹赛多在鲤体内的药物动力学及残留的研究方法准确，可靠。 喹赛多在鲤体内具有分布迅速，广泛，而消除缓慢的药物动力学特点。与哺乳动物 相比具有较长的消除半衰期．但是生物利用度较低，仅有1．3％。残留消除实验中， 肝脏中喹噶啉-2-羧酸含量最高，消除最慢，因而可以认为肝脏为残留消除的靶组 织，喹嗯啉一2一羧酸为靶化合物并存