利拉鲁肽对高脂喂养大鼠棕色脂肪组织 标志性基因表达的影响-内分泌与代谢病专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 中文摘要1 英文摘要5 英文缩写9 研究论文 利拉鲁肽对高脂喂养大鼠棕色脂肪组织标志性 基因表达的影响 前言10 材料与方法12 结果25 附图27 附表34 讨论38 结论42 参考文献43 综述 白色脂肪棕色化及其调控因素46 致谢56 个人简历57 中 中 文 摘 要 PAGE 1万方数据 PAGE 1 万方数据 利拉鲁肽对高脂喂养大鼠棕色脂肪组织 标志性基因表达的影响 摘 要 肥胖是由多种因素引起的以体内脂肪细胞的体积和数量增加为特点 的一种临床状态，它是众多疾病（如 2 型糖尿病、代谢综合征、心血管疾 病、非酒精性脂肪肝等）的一个重要风险因素。但是，体内的脂肪组织并 不都是“有害”的。 根据脂肪细胞结构和功能的不同，哺乳动物体内的脂肪组织分为两 种：白色脂肪组织（WAT）和棕色脂肪组织（BAT）。WAT 即我们通常 所说的脂肪组织，广泛分布于皮下和内脏周围，主要由白色脂肪细胞聚集 而成，其功能是将体内过剩的能量以甘油三酯的形式储存起来；BAT 主 要分布于颈背部、腋窝及肩胛间区，由棕色脂肪细胞组成，细胞内含有丰 富的线粒体，棕色脂肪的主要生理作用是非寒颤性产热，可通过解偶联作 用将体内过多的脂肪分解和消耗。除了经典的棕色脂肪细胞和白色脂肪细 胞，最近人们发现了一种米色脂肪细胞，它是在某些刺激条件下，“白色 脂肪棕色化”过程中产生的存在于白色脂肪组织中的“棕色样”脂肪细胞， 与经典的棕色脂肪细胞有着相似的作用。 利拉鲁肽是人胰高血 糖素样肽-1（GLP-1）的一种类似物，它能够以 葡萄糖浓度依赖的模式刺激胰岛素的分泌，同时以葡萄糖浓度依赖的模式 降低过高的胰高糖素的分泌。因此，临床上利拉鲁肽主要用于治疗 2 型糖 尿病。但是，最近有研究发现，GLP-1 可促进棕色脂肪前体细胞向成熟的 棕色脂肪细胞分化，并且通过脑室内注射 GLP-1 受体激动剂可增加棕色 脂肪组织活性，促进棕色脂肪组织产热。 本课题通过对高脂喂养大鼠注射利拉鲁肽，并检测其棕色脂肪组织中 标志性基因蛋白及 mRNA 的表达，探讨了利拉鲁肽对棕色脂肪功能的影 响，揭示了利拉鲁肽减肥作用的可能机制。本研究可为未来临床上肥胖及 其相关代谢性疾病的预防和治疗提供新的思路。 目的：研究利拉鲁肽对高脂喂养大鼠棕色脂肪组织中标志性基因表达 的影响，并探讨利拉鲁肽对这些基因表达的影响与其浓度的关系。 方法：清洁级健康雄性 SD 大鼠 40 只（体重 240g-260g），适应性喂 养 1 周后随机分为 5 组：正常对照组（Con）、高脂对照组（HF）、利拉 鲁肽低剂量组（Lira-L）（0.4mg/kg/d）、利拉鲁肽中剂量组（Lira-M） （0.6mg/kg/d）、利拉鲁肽高剂量组（Lira-H）（0.8mg/kg/d），每组 8 只。 正常对照组给予普通饲料喂养，热量组成：碳水化合物 65.5%，脂肪 10.3%， 蛋白质 24.2%，总热量为 348kcal/100g；高脂对照组及利拉鲁肽低、中、 高剂量组均给予高脂饲料喂养，热量组成：碳水化合物 20.1%，脂肪 59.8%， 蛋白质 20.1%，总热量为 501kcal/100g；每天给予各组等热量的普通饲料 或高脂饲料。将 6mg（1ml）利拉鲁肽溶于 11ml 生理盐水中，配制成浓 度为 0.5mg/ml 的混合液，分别给予利拉鲁肽低、中、高剂量组 0.4mg/kg/d、 0.6mg/kg/d、0.8mg/kg/d 利拉鲁肽日二次皮下注射，正常对照组及高脂对 照组分别给予等量生理盐水日二次皮下注射，分别干预 12 周。于 12 周末 称重后处死大鼠，留取血清及肩胛部棕色脂肪组织，称量肩胛部棕色脂肪 组织的重量；检测血清生化学指标；HE 染色观察大鼠棕色脂肪组织形态 学变化；Real-Time PCR 检测棕色脂肪组织中解偶联蛋白-1（UCP1）、过 氧化物酶体增殖物激活受体 γ（PPARγ）、细胞死亡诱导的 DFFA 样效应 因子 A（CIDEA）、过氧化物酶体增生物激活受体辅助活化因子 1α （PGC-1α）、CCAAT 增强子结合蛋白 β（CEBPβ）、PR 结构域家族的第 16 个成员（PRDM16）的 mRNA 表达水平；Western Blot 检测棕色脂肪组 织中 UCP1、PPARγ、CIDEA、PGC-1α、CEBPβ、PRDM16 蛋白表达水平。 结果： 1.12 周末大鼠体重及棕色脂肪重量的结果： （1）体重：实验起始时各组大鼠体重无明显差异，干预 12 周后，利 拉鲁肽低、中剂量组大鼠体重均明显低于高脂对照组和正常对照组，利拉 鲁肽高剂量组大鼠体重低于高脂对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05） （Fig.1，