扇贝多肽对60钴γ射线辐射诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的作用及其初步机制研究-临床肿瘤学专业论文.docxVIP

堕墨兰壁翌塑盟垦量塑塑望型立塑堡旦墨墨塑垄!!型竺塑一——扇贝多肽对60钻Y射线辐射诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的 堕墨兰壁翌塑盟垦量塑塑望型立塑堡旦墨墨塑垄!!型竺塑一—— 扇贝多肽对60钻Y射线辐射诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的 作用及其初步机制研究 硕士研究生 关印 导 师 梁军 摘 要 目的：评价扇贝多肽对单次”钴y射线辐射诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的作用及 其初步机制研究。方法：制备昆明小鼠胸腺细胞悬液并给予2Gy剂量的”钴Y射 线辐照，吸收剂量率为0．6Gy／rain，建立淋巴细胞损伤模型。实验设计分为5组： 以单独培养细胞为空白对照组，单独辐射细胞为模型组，不同扇贝多肽浓度 (O．5mg／ml，O，25mg／ml，0．125mg／m1)预处理(在辐照前2小时给药)为实验组。 辐照后继续培养3小时，然后运用透射电镜从形态学观察细胞超微结构的改变：琼 脂糖凝胶电泳从大分子生化水平观察DNAladder的变化；生化法从酶学角度测定胞 浆超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量：通过流式细胞仪溴化丙啶染色 从DNA水平测定细胞凋亡率、Fluo一3．AM荧光染色测定细胞内游离【ca2+】、等几方面 改变来评价扇贝多肽的作用及其初步作用机制。结果：我们发现在强度为2Gy”钻 辐射情况下：实验组细胞经用扇贝多肽(0．125—0，5％浓度范围内)预处理后抑制了 ”钴辐射所致淋巴细胞早、中、晚期凋亡的形态学改变，维持细胞的正常超微结构； 抑制了淋巴细胞DNA ladder的出现；细胞脂质过氧化(MDA)水平有所降低而超 氧化物歧化酶(SOD)活性可以维持在正常水平；降低了淋巴细胞内游g[Ca”1．上 升程度、降低了淋巴细胞凋亡率。以上统计结果差异均有显著性(P0．05)。结论： 扇贝多肽对”钴y射线辐射导致的昆明小鼠胸腺细胞的损伤有保护作用，其作用机 制与扇贝多肽能减轻细胞膜过氧化损伤，维持细胞抗氧化能力，降低细胞损伤后胞 内c矛+升高及引起细胞周期阻滞于GI期有关，为其作为辐射防护剂提供了依据。 关键词：扇贝多肽；辐射j坊护剂；凋亡；Y射线 2 生墨兰堕翌塑塑至量竺塑些型主竺堡旦些茎塑垄!!!!墅塞——Effect 生墨兰堕翌塑塑至量竺塑些型主竺堡旦些茎塑垄!!!!墅塞—— Effect and primary mechanism of polypeptide from Chlamys farreri (PCF)on the apoptosis of thymocytes induced by Y—ray irradiation Postgraduate GUANYin Tutor： LlANG Jun [Abstract]0bjective To evaluate the effect and primary mechanism ofpolypeptide from Chlamysfarreri(PCF)on the apoptosis ofthymocytes induced by Y—ray irradiation， Methods Thymocytes of KM mice was given single 2Gy Y—ray irradiation with a dose rate of O．6Gy／min．This study consisted of five groups：cells cultured in medium alone was control group，those irradiated by Y—ray was model group，and those pretreated with PCF at various concen仃afion r0．5 mg／ml，O．25 mg／ml，0．125mg／m1)were experiment groups．Changes of morphologic ultrastructure，DNA ladder，enzyme，nucleic acid，and intracellular free calcium were observed．Results The ultrastructural damages of the cells were inhibited by PCF；DNA ladders were decreased；the level of MDA，a marker of lipid peroxidation．is down-regulated and the activity of SOD in group treated wim 0．5 mg／ml PCF is maintained in normal level．The concentrat