植物组织培养.docx

1、植物组织培养：在无菌条件下利用人工培养基满足植物组织培养生长发育的需要。 2、组培的类型：①植株培养。②胚胎培养。③器官培养。④组织培养。⑤细胞培养。⑥原生质体培养。 3、细胞全能性：植物细胞含有该个体的一套完整的基因组，具有其全部遗传信息，在一定条件下能够生长发育成一个完整植株的能力。 4、细胞的分化：细胞在形态结构和功能上发生永久的适度变化过程。 脱分化：成熟的细胞转变或回复到分生状态的过程，而进行分裂形成愈伤组织的过程。 再分化：已经脱分化的细胞回复或再转化为具有一定结构、执行一定生理功能的细胞团和组织，构成一个完整的植物体或植物器官的现象。 5、植物组培的应用前景：①植物快速繁殖。②作物脱毒技术。 在作物育种上的应用：①花药和花粉培养上的应用。②胚胎培养的应用。③细胞融合的应用。④基因工程的应用。⑤培养细胞突变体的应用。⑥种植保存应用。 6、无菌环境和消毒技术：常用方法，用紫外灯照射组培室、定期用75%酒精、来苏尔、福尔马林、双氧水、漂白粉等喷地面和擦墙壁。①洗涤。②培养基的灭菌。③玻璃塑料和器械。④植物材料表面灭菌。⑤接种。⑥培养容器的封口。 7、无菌操作：①将洗好的植物材料放入广口瓶或烧杯中，置超净工作台上消毒、并计时。②消毒后立即倒入无菌水盖盖、轻摇，2~8分后将水倒去，再加无菌水洗3、4次。③用已消毒的解剖刀或剪刀进行切割。④外植体植入培养基表面。 8、高压灭菌锅的安全使用：①注水。②加料。③通电加热。④排冷气。⑤保压灭菌。 ⑥断电冷却。 9、培养基成分：无机营养成分、有机营养成分、植物激素、琼脂及其他成分。 10、大量元素（含量大于0.5mmol/l）：氮（细胞合成蛋白质）、硫、磷（细胞核）、钾（维持细胞原生质体）、钙、镁 微量元素：铁、锰、硼、锌、钼、铜。 11、常用的碳源是蔗糖、浓度为2%~5%。一般低浓度（1.5%~2.5%）的糖有利于木质部生长；高浓度（3%~4%）的糖促进韧皮部生长。 12、植物激素：①生长素（IAA、IBA、NAA、2，4D）。②细胞分裂素（BAP、ZT、KT）③赤霉素GA和脱落酸ABA. 13、活性炭(AC)主要是为了吸附的有害泌出物。防止组织培养物褐变的发生。硝酸银（AgNO3）促进愈伤组织器官发生或体细胞胚胎发生的作用。 14、培养基的配制（1L）：①按需称取琼脂和蔗糖。②分别加入一定量的贮备液Ⅰ50ml；Ⅱ5ml；Ⅲ5ml；Ⅳ5ml。③加蒸馏水定容至1L。④趁热分装于试管里，每管15ml。⑤用棉塞加牛皮纸封口，装入灭菌锅15分钟后取出。⑥待冷却后做标记保存。 15、母液吸取量计算：V0=V1\T或V0=(C1*V1)\C0。 V0—吸取母液的体积（ml）。V1—配制培养基体积（ml）。C0—母液浓度(mg\L)。 C1—配制培养基的浓度（mg\L）。T—母液扩大倍数。 16、选择培养基的方法：①预备性实验。②单因子实验。③多因子及正交实验。④逐步添加或排除实验。 17、培养基主要因子的选取：①基本培养基的选择。②植物激素配比的选择。③唐浓度的选取。④PH值的选取。⑤综合因子的确定。 18、愈伤组织及其形成的条件：自然界植物受到机械损伤后诱导细胞分裂，在伤口处产生一团没有分化的薄壁细胞把伤口封住，次为愈伤组织。条件：①离体条件。完整的生物体的形态、机能都是协调统一的。②激素。 19、愈伤组织的形成：①诱导期。②分裂期。③分化期。。影响愈伤组织培养的因子：①外植体。②培养基。③激素。 20、影响微管分化的因子：①生长素。②蔗糖。③细胞分裂素。 21、再生植株发生方式：愈伤组织：①器官发生。②体细胞胚发生。。通过器官发生形成再生植株的方式：①先分化芽再分化成完整植株。②先分化根再分化芽。③在愈伤组织的不同部位分化出根和芽，再通过微管组织形成完整植株。 22、试管苗、如何炼苗：①培育壮苗。②洗净琼脂培养基。③选用适合的移植基质。④移栽后条件控制。 23、体细胞胚（胚状体）：植物组培中由一个非合子细胞经过胚胎发生和发育形成的胚构。来源：①植物体多种器官、组织、游离的体细胞产生。②小孢子等单倍体细胞产生。。。影响胚化因子：植物激素、其他因子（氧化氮和还原氮）。 24、体细胞胚发生的途径：①直接发生，直接有器官、组织等发育的，不经过愈伤组织 ②外植体先愈伤化、再由愈伤组织分化为体细胞胚。 25、合子胚与体细胞胚比较：不同点：合子胚是双受精产生的，有胚乳和种皮。体细胞胚是离体培养的诱导的，没有受精也没有胚乳和种皮。两者在脂类、蛋白质、糖类的含量上也有差异。相同点：极性和生殖隔离两者有相似之处。两种胚的发生程序大体是相