实验三 蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备和不同强度和频率的刺激髓肌肉收缩的影响.ppt

实验三 蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备及不同强度和频率刺激对肌肉收缩的影响 实验目的 掌握制备具有正常收缩功能的蛙类坐骨神经腓肠肌标本的基本操作技术，掌握蛙类手术器械的使用方法。 通过增加和减少对蟾蜍坐骨神经的刺激强度和频率，观察记录腓肠肌收缩张力，分析探讨刺激强度和频率对骨骼肌收缩张力的关系。 学习微机生物信号采集处理系统的使用。 实验原理-1 蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相似之处，而且其离体组织的生活条件比较简单，易于控制和掌握。因此，蛙或蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本常被用来观察神经肌肉的兴奋性刺激与反应的规律及肌肉收缩特点等实验 实验原理-2 肌肉、神经和腺体组织称为可兴奋组织，它们有较大的兴奋性。不同组织、细胞的兴奋表现各不相同，神经组织的兴奋性表现为动作电位，肌肉组织的兴奋表现为收缩活动。因此观察肌肉是否收缩可以判断它是否产生了兴奋。一个刺激是否能使组织发生兴奋，不仅与刺激形式有关，还与刺激时间、刺激强度、强度－时间变化率三要素有关。 刺激神经使神经细胞产生兴奋，兴奋延神经纤维传导，通过神经肌接头的化学传递，使肌肉终板膜上产生终板电位，终板电位可引起肌肉产生兴奋，即动作电位，传遍整个肌纤维，再通过兴奋-收缩偶联使肌纤维中粗、细肌丝产生相对滑动，宏观上表现为肌肉收缩 单收缩、复合收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩 材料和方法 1、实验动物（laboratory animal) 蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，Zhuoshan Toad） 雄性蟾蜍皮肤光滑，前肢趾上有黑色婚垫，会鸣叫。雌性蟾蜍皮肤粗糙，无婚垫，不会鸣叫。 婚垫 雄蟾 雄蟾 雌蟾 1.材料和方法 (Materials and methods ) 2、药品(drug) ： 任氏液 任氏液由无机盐和蒸馏水配置而成，每升溶液含NaCl 6.5g、KCl 0.14g、CaCl2 0.12g,、NaHCO3 0.20g、NaH2PO4 0.01g。任氏液的理化特性与蛙的组织液近似。可用于蛙的组织、器官润湿和营养。 3、器材( Experimental apparatus) RM6240生物信号处理系统（成都仪器厂）、神经标本盒、蛙板、剪刀、探针、玻璃分针、镊子、张力换能器。 RM6240C微机生物信号处理系统 S+ S- E R1 - R1+ R2- R2+ 材料和方法－方法（N-M标本的制备） 1．毁脑脊髓 2．去下肢皮肤 3．去上肢、内脏、头 4．分离两腿 5. 大腿坐骨神经 6. 游离坐骨神经 7．游离腓肠肌 8．去掉小腿骨、肌肉、脚 材料和方法－方法（仪器连接） 腓肠肌 坐骨神经 换能器 保护电极 刺激强度和频率对肌肉收缩的影响实验装置示意图 结果观察 单收缩：肌肉受到一次刺激，引起一次收缩和舒张的过程。 复合收缩:肌肉受到连续刺激，前一次收缩和舒张尚未结束，新的收缩在此基础上出现的过程。 ①不完全强直收缩 ② 完全强直收缩 讨论 刺激强度对肌肉收缩的影响 刺激强度小于兴奋性最高的运动单位的阈值时 中等刺激强度时 刺激强度大于兴奋性最低的运动单位的阈值时 刺激频率对肌肉收缩的影响 刺激落在前一次刺激引起的收缩的舒张期之后 刺激落在前一次刺激引起的收缩的舒张期上 刺激落在前一次刺激引起的收缩的收缩期上 注意事项 标本制备时要注意保持标本的湿润。 标本制备时尽量避免使用尖锐的、铁制器械，以免损伤神经、肌肉。 标本的股骨要保留一部分（后2/3），以利于下一步实验。脊柱保留一段 实验中保持换能器与标本连线的张力不变。 标本未给刺激即出现挛缩，是由于漏电引起，请检查连接。