厌氧菌的培养方法要点.pptxVIP

厌氧菌的培养方法 ;物理方法包括遮断空气法、煮沸法、真空法、空气置换法、气体喷射法或转管法等 化学方法包括焦性没食子酸法、铁丝绒法、保险粉法等 生物学方法包括与需氧菌共生好氧法、燕麦发芽法等 混合法包括厌氧罐（袋）法、厌氧手套箱法或厌氧室法、空气置换铁丝绒法、空气置换钯粒法等。 ;1 液体培养基的厌氧培养法;2 固体培养基的厌氧培养法;2.1 Gas-pak法; 原理; 厌氧指示剂 ; 亚甲基兰 指示剂;卢卡斯固体厌氧指示剂 ; 布鲁氏指示剂 ;Gas-Pak法的使用操作程序 ;2.2.1 简易厌氧罐 ;2.2.2 厌氧袋法 (三菱瓦斯化学株式会社);;适合嗜二氧化碳菌 培养;培养容器系列产品;;MGC厌氧培养产品信息列表;厌氧培养气体变化曲线图;微需氧培养气体变化曲线图;1.新鲜指示剂为粉红色（无氧，左）和蓝色（有氧，右），重复使用后受环境影响，反应减弱，指示剂变为浅紫色（无氧，中左）和淡蓝色（有氧，中右）。2.厌氧培养2-3小时后指示剂颜色变化稳定。;2.2.3 保险粉的厌氧罐培养法 ;2.3 钢丝绒法 ;酸性硫酸铜溶液： 将自来水1升加硫酸铜60g，吐温-80 20ml，加热溶解后，又加入2N的硫酸90ml，最后加水至6升 ； 方法： 取5～6g钢丝绒/ L，于1～1.5升酸性硫酸铜溶液浸泡30～60s，钢丝绒变成红铜色，挤净液体置铝质或玻璃容器中，放入厌氧罐内。随后将厌氧指示剂放入，密封厌氧罐，1～4h后可达厌氧状态 ;2.4 焦性没食子酸法;2.5 抽气换气厌氧培养法 ;1：厌氧培养罐 2：混合气体（CO2：H2：N2=1：1：8）钢瓶;2.6 生物好氧厌氧培养法 ;2.7 转管技术和气体喷射培养法;2.8厌氧手套箱法;;3 厌氧培养方法的选择;4 厌氧菌的保存; 4.2 冷冻保存： 20％脱脂牛奶0.5ml分注在带螺旋塞的玻璃瓶中，经110℃、15分钟高压灭菌，冷却后，先用毛细吸管取半固体高层培养基24～48h生长茂盛部位的厌氧菌液0.5ml，加入玻璃瓶中，直接置于－80℃冰库中保存。 厌氧菌较理想的保存方法是液氮保存法。将108以上浓菌液置脱纤维羊血、脱纤维兔血或羊血牛奶各半的分散剂中，先在干冰中预冻，然后连容器一起放入液氮罐中。; 谢谢 北京九和永泰科技有限公司/淮安九和生物科技有限公司 王龙 0517