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药理学实验与设计;一、实验设计的三个基本要素;根据研究目的由实验者施加给受试对象的因素。;(二) 实验对象 ;动物种属的选择
中枢神经系统药物—猴
抗过敏药物—豚鼠
2. 正常动物选择的一般原则
(1) 年龄、体重
如小鼠18-28g, 大鼠180-280g, 兔2-3kg
(2) 性别
药效多有差异
(3) 生理与健康状况
需动物合格证、上岗证;(三) 实验效应(指标) ;2. 注意事项
(1) 特异性
能反映某一特定现象且不与其他现象相混淆。
(2) 客观性
易于量化的、经过仪器测量和检验而获得的。
(3) 重复性
在相同条件下指标可以重复出现。
;灵敏性
根据实验要求相应显示出微小的变化,由实验方法和仪器的灵敏度共同决定
(5) 可行性
既有文献依据,又符合本实验室条件和研究者实际水平。 ;二、实验设计的三个基本原则 ;(一) 对照原则;(1) 空??对照(正常对照,阴性对照)
在不加任何处理条件下所设的对照
(2) 实验对照(模型对照)
在某种有关实验条件下所设的对照,如动物模型
(3) 自身对照
用同体实验前资料作为对照
(4) 标准对照(阳性对照)
用已证实有效或已批准上市的药物作为对照
(5) 相互对照
实验中各实验组互为对照;常见动物分组:
(1) 正常对照组
(2) 模型对照组
(3) 受试药小剂量组
(4) 受试药中剂量组
(5) 受试药大剂量组
(6) 阳性药对照组;(二) 随机原则;常用方法: (1)简化分层随机法
常用于单因素小样本的一般实验。
即将同一性别动物按体重大小顺序排列,分组时由体重小的到大的按次序随机分到各组。在一个实验中体重不宜相差过大。一种性别的动物分配完后,再分配另一性别的动物。各组雌雄性别数目应一致。 ; 完全随机法
主要用于单因素大样本的实验。先将样本编号后,按随机数字表任取一段数字,依次排序各样本。然后按这些新号码的奇偶(两组)或除以组数后的余数(两组以上)作为分配归入的组次。最后仍同前再随机调整,以使各组样本数达到均衡。 ;(三) 重复原则 ;三、实验设计的步骤与内容;1. 查阅文献,确定选题和提出立题依据
注意科学性、创新性和可行性。;设计内容包括:
(1) 确定受试药给药途径、给药剂量
(2) 选择实验对象
(3) 确定动物模型
(4) 确定样本例数及分组方法
(5) 确定观察时间、指标及测定方法
(5) 拟定数据统计分析方法;四、药理学实验范例与实践 ;
【立题依据】患者反映使用X药期间伴有血压升高现象,己有资料证实该药无直接影响心脏泵血功能的作用,也未见有升血压的报道,其升压作用推测与血管收缩或血量增多有关。 【目的】初步验证该药的升压效应,并探索其升压机制。 【药品】X药(要求配好浓度)。 【仪器】D-951信号接收系统(含压力换能器),动物手术器械。 【动物】家兔。 ;【方法】取家兔1只,称重,耳缘静脉用3%戊巴比妥钠缓慢注射常规麻醉,分离颈动脉,插入联接D-951信号接收系统的压力传感器,测动脉压(指标),实验采用自身对照及拉丁方设计。【分组】实验分为①甲药组;②受体阻断药1+X药组;③受体阻断药2+X药组。【预期结果】X药有升血压作用,并可能通过某受体起作用。;?
【目的】观察肝功能损伤对戊巴比妥钠作用的影响。
【器材】天平,1 ml注射器,组织剪。
【药品】25%四氯化碳油溶液,0.15%戊巴比妥钠。
【动物】小白鼠。
【方法】在实验前24h先取小鼠2只,25%四氯化碳油溶液灌胃0.1 ml/10g造成肝损伤。实验时取给予四氯化碳小鼠和正常小鼠各2只,均腹腔注射0.15%戊巴比妥钠0.2 ml/10g,观察动物反应。记录各鼠翻正发射消失和恢复时间,并计算入睡时间和睡眠时间。
【结果】将所观察的实验结果填入下表。;表8 肝功能损伤对戊巴比妥钠作用的影响;表8 肝功能损伤对戊巴比妥钠作用的影响;
【目的】了解大剂量可拉明的中毒表现——惊厥,观察巴比妥类药物的抗惊厥作用。
【器材】250ml烧杯,铁丝笼,1ml注射器,注射针头。
【药品】1%苯巴比妥钠,5%可拉明,0.5%戊巴比妥钠【方法】取体重相近的小白鼠3只,称重,编号。1号鼠腹腔注射生理盐水0.1 ml/10g,2号鼠腹腔注射2%苯巴比妥钠溶液0.1 ml/10g,15 min后3只鼠同时皮下注射5%可拉明溶液0.1 ml/10g,待发生惊厥后
(以
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