巨型艾美耳球虫ADF基因的克隆及原核表达高江明刘兆辉宫鹏涛.docVIP

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  • 2019-05-31 发布于天津
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巨型艾美耳球虫ADF基因的克隆及原核表达高江明刘兆辉宫鹏涛.doc

巨型艾美耳球虫基因的克隆及原核表达高江明刘兆辉宫鹏涛李建华杨举李赫张国才张西臣吉林大学畜牧兽医学院吉林长春摘要目的克隆巨型艾美耳球虫的基因并进行原核表达方法采用方法扩增出基因并将其与原核表达载体连接构建原核表达载体转化大肠杆菌中诱导表达经和鉴定表达产物结果重组原核表达质粒经双酶切及测序鉴定结果正确表达出的融合蛋白表达量约占菌体总蛋白的蛋白印迹检测其具有一定的反应原性结论原核表达了蛋白为其免疫原性的研究奠定了基础关键词巨型艾美耳球虫基因原核表达基金项目和国家自然科学基金作者简介高江明男在读硕士研究

巨型艾美耳球虫ADF基因的克隆及原核表达 高江明,刘兆辉, 宫鹏涛,李建华,杨举,李赫,张国才,张西臣* (吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春 130062) 摘要:目的 克隆巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)的ADF基因,并进行原核表达。方法 采用RT-PCR方法扩增出ADF基因,并将其与原核表达载体pET-28a连接。构建原核表达载体pET-28a-ADF,转化大肠杆菌Rossata(DE3)中,IPTG诱导表达,经SDS和Western blot鉴定表达产物。结果 重组原核表达质粒经双酶切及测序鉴定结果正确。表达出17KDa的融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的20

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