雌激素缺乏上调TNF-α促发卵巢切除大鼠骨细胞程序性坏死.pdfVIP

中国骨质疏松杂志　 ２０１７年１１月第２３卷第１１期　 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ２０１７，Ｖｏｌ２３，Ｎｏ． １１ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｏｎｌｉｎｅｗｗｗ．ｗａｎｆａｎｇｄａｔｅ．ｃｏｍ．ｃｎ　 ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００６⁃７１０８ ２０１７． １１００７ １４３１ ·论著 · 雌激素缺乏上调ＴＮＦ⁃α促发卵巢切除大鼠骨细胞 程序性坏死 １ １ １ １ １ １ ２∗ 崔红旺　 孟志斌 　 王挺锐 　 祝开忠　 史方富　 唐崧杰　 朱永俊 １．海南医学院第一附属医院脊柱骨病外科，海南 海口５７０１０２ ２．海南医学院第一附属医院肾病风湿科，海南 海口５７０１０２ 中图分类号： Ｒ⁃３３２　 　 文献标识码： Ａ　 　 文章编号： １００６⁃７１０８（２０１７） １１⁃１４３１⁃０７ 摘要： 目的　 探讨雌激素缺乏对去卵巢骨质疏松大鼠骨细胞程序性坏死的影响及其发生机制。 方法　 ６０ 只雌性ＳＤ大鼠随 机分为Ｃｏｎｔｒｏｌ组（１２ 只）和ＯＶＸ组（４８只），分别行假手术或ＯＶＸ术；再将４８ 只ＯＶＸ大鼠分为ＯＶＸ＋ｖｅｈｉｃｌｅ、ＯＶＸ＋Ｎｅｃ⁃１、 ＯＶＸ＋Ｚ⁃ＶＡＤ和ＯＶＸ＋Ｅ 组，每组１２ 只。 Ｍｉｃｒｏ⁃ＣＴ扫描评价胫骨近端骨量改变；免疫组化法测定骨细胞ＴＮＦ⁃α、ＲＩＰ１、ＲＩＰ３ ２ 的表达情况，并计算各组阳性细胞百分率；用透射电镜鉴定细胞形态学变化；Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测程序性坏死下游信号通路蛋白 ＭＬＫＬ、Ｄｒｐ１的表达情况。 结果　 ＯＶＸ＋ｖｅｈｉｃｌｅ组大鼠胫骨近端出现明显的骨量丢失，即ＯＶＸ ＋ ｖｅｈｉｃｌｅ组Ｔｂ．Ｔｈ、ＢＶ／ ＴＶ、 Ｔｂ．Ｎ小于Ｃｏｎｔｒｏｌ组（Ｐ＜００１）；而ＯＶＸ ＋ ｖｅｈｉｃｌｅ组Ｔｂ．Ｓｐ大于Ｃｏｎｔｒｏｌ组（Ｐ ＜００１）。 ＴＮＦ⁃α、ＲＩＰ１、ＲＩＰ３蛋白在骨细胞胞 浆中均有表达；在ＯＶＸ＋ｖｅｈｉｃｌｅ组，ＴＮＦ⁃α、ＲＩＰ１、ＲＩＰ３ 阳性骨细胞百分率较 Ｃｏｎｔｒｏｌ组显著增多（Ｐ ＜００１），在 ＯＶＸ ＋ｖｅｈｉｃｌｅ 组可见大量坏死样结构的骨细胞。 应用Ｎｅｃ⁃１治疗后可有效抑制ＲＩＰ１蛋白表达，而Ｚ⁃ＶＡＤ对ＲＩＰ１、ＲＩＰ３蛋白表达无影响， 在ＯＶＸ＋Ｎｅｃ⁃１组未见到坏死样结构的骨细胞。 在ＯＶＸ＋ｖｅｈｉｃｌｅ组，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显示ＭＬＫＬ、Ｄｒｐ１蛋白表达较Ｃｏｎｔｒｏｌ组 显著增多（Ｐ＜００１），应用Ｎｅｃ⁃１治疗后可有效抑制ＭＬＫＬ、Ｄｒｐ１蛋白表达，而Ｚ⁃ＶＡＤ对 ＭＬＫＬ、Ｄｒｐ１蛋白表达无影响。 结论 雌激素缺乏可能是通过上调ＴＮＦ⁃α表达而促发骨细胞发生程序性坏死的，ＭＬＫＬ、Ｄｒｐ１可能是骨细胞程序性坏死的下游关键 信号分子。 关键词： 雌激素；肿瘤坏死因子α；程序性坏死；骨细胞；骨质疏松；大鼠；动物实验 Ｅｓｔｒｏｇｅｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｏｓｔｅｏｃｙｔｅ ｎｅｃｒｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ＯＶＸ ｒａｔｓ ｂｙ ｕｐ⁃ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ＴＮＦ⁃α １ １ １ １ １ １ ２∗ ＣＵＩ Ｈｏｎｇｗａｎｇ ，ＭＥＮＧ Ｚｈｉｂｉｎｇ ，ＷＡＮＧ Ｔｉｎｇｒｕｉ ，ＺＨＵ Ｋａｉｚｈｏｎｇ ，ＳＨＩ Ｆａｎｇｆｕ ，ＴＡＮＧ Ｓｏｎｇｊｉｅ ，ＺＨＵ Ｙｏｎｇｊｕｎ １． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｐｉｎｅ ａｎｄ Ｏｓｔｅｏｐａｔｈｉｃ Ｓｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｈａｉｎａｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈａｉｋｏｕ５７０１０２ ２． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｈａｉｎａｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈａｉｋｏｕ５７０１０２，Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ＺＨＵ Ｙｏｎｇｊｕｎ，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｃｑｃ