山核桃干腐病的生物学特性与控制研究-植物保护专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 独 独 创 性 声 明 本人声明，所呈交的学位论文，是在指导教师指导下，通过我的努力取得的成果，并且是自 己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已经作了答谢的地方外，论文中不包含其他人 发表或撰写过的研究成果，也不包含在浙江农林大学或其他教育机构获得学位或证书而使用过的 材料。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意。如被查有 严重侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。 学位论文作者亲笔签名： 日 期： 论文使用授权的说明 本人完全了解浙江农林大学有关保留、使用学位论文的规定，即学校有权送交论文的复印件， 允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制 手段保存论文。 保密，在 年后解密可适用本授权书。□ 不保密, 本学位论文属于不保密。 □ （请在方框内打“√”） 学位论文作者亲笔签名： 日 期： 指导教师亲笔签名： 日 期： 摘要 摘要 摘要 干腐病近年来在山核桃(Carya cathayensis）主产区发病较为严重，给山核桃产业 带来了严重的威胁，使种植户受到较为重大的经济损失。目前针对引起山核桃干腐病 的葡萄座腔菌（Botryosphaeria dothidea）检测与防治等方面缺乏系统的研究，山核桃 干腐病病原菌潜伏在山核桃树干上时无法进行检测。因此为了促进山核桃产业的发 展，本论文以引起山核桃干腐病的葡萄座腔菌为研究对象，以临安昌化、於潜所采集 的山核桃干腐病菌为材料，应用 PCR 检测、生物学特性研究、药剂敏感性测试等方 法，检测了葡萄座腔菌分子序列，并设计特异性引物直接用于树皮感病检测，山核桃 干腐病病原菌潜伏期检测，分析了适于葡萄座腔菌生长的氮源、碳源、pH 值等生物 学要素，研究了葡萄座腔菌较为敏感的药剂配方，建立该病菌检测与防治体系。主要 研究结果如下： 1.分子检测体系 设计引物 tubulinF 和 tubulinR，引物序列分别为：tubulinF/tubulinR。以葡萄座腔 菌的特异性引物 tublinF/tublinR 对参照菌株 DNA 进行 PCR 反应，在葡萄座腔菌中扩 增得到 1 条 306bp 的条带，而在其他参照菌株中均未获得任何条带，这表明本实验所 设计的引物具有较好的特异性。这个特异性引物可以运用于整个山核桃干腐病菌的检 测试验。 2.生物学特性研究 山核桃干腐病病原菌在自然条件下生长往往容易受到温度、氮源、碳源、渗透压 等环境因子的影响，该病菌孢子最适宜温度为 25℃，在 25℃时孢子萌发率最大，15℃ ~30℃温度区间适宜干腐病发生发展。干腐病病原菌最适碳源为蔗糖，氮源为酵母粉， 最适 pH 为 6；最适渗透压为每 100ml 培养基中添加 0g~0.1g 氯化钠所达到的渗透压。 3.药剂防治措施 统计发现了山核桃干腐病病原菌林间孢子释放高发期为每年的四月初到七月底， 在每年 5 月中旬左右为孢子释放高峰期，因此，在三月份就要做好干腐病预防工作。 并且发现肟菌酯抑菌效果不好，价格相对较高，不适宜防治使用。 关键词：山核桃干腐病、葡萄座腔菌、分子检测体系、生物学、药剂防治 I ABSTRACT Botryosphaeria dothidea has become main plant disease of Carya cathayensis in the producing areas. This disease made a serious threat to industry, and made the growers to has a more economic losses in recently. Now, there has no systematic research to detection and prevention, and can not test directly while the B. dothidea in the trees. So this thesis use the B.dothidea from Zhejiang Lin` an to identify the molecular sequence of B.dothidea, research the biological characteristics, and test the sensitive of chemicals. As the result of establishment of the pathogen detection and prevention system. Identify system by molecular Primers named tub