山楂叶总黄酮提取物质量标准及化学成分研究-药物化学专业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 皮素、芦丁、金丝桃试、牡荆素等多种化学成份，其中懈 皮紊及其武类是山植叶的主要成份，也是其在心血管系统 疗效的有效成份之 一。因此，本文建立了以糊皮素为对照 品，用高效液梧色谱法测定山橙时总黄罢需提取物中榜 i皮素 含量的方法。 吕的z 建立山植叶总黄圈可提取物的质量支标准 方法和结果:以糊皮素为对照品，在高效液相色谱仪 上筛选测定山植叶总黄翻提取物中褂皮素含量的最佳色 谱条件，并进行系统适用性试验和方法学考察。在此基础 上，对 5 批山植叶总黄翻提取物中制皮素的含量进行测 定。 色谱条件:色谱柱为 DiscoveryC18 (250*4.6mm) ， 流动相为甲醇 (40%)-0.4%磷酸水仿佛)→甲醇 (60%) -0.4% 磷酸水 (40%) 在 75 分钟内作线性梯度洗脱，流速为 0.6ml/mìn ，柱混为30士 10C，检测波长为256nmo 色谱系统适用性试验:理论塔板数 CN) 按梯|皮素计 为 28681 声保留时间们在〉为 50 分钟，拖尾因子为 1.0080 线性回归方程的建立:称取懈皮素标准品 4mg ，精密 称定，用甲醇配成不同浓度的标准溶滚，依色谱条件进行 分离，测得各自峰面积，以峰面积对相应重量作图， Y=186848150X 422161.40 ，俨O.9994(n=5) ，线性范围为 0.084-0. 42ugo 精密度试验:吸取标准溶液 10址，进祥。依色谱条 件进行分离， RSD 值为 1.84% (n=5) 。 样品提取方法的研究: (1) 提取方法:取山摄叶总黄 眼提取物 40mg ，分别精密称取3 份，第 1 份放入 10ml 容 2 量瓶中直接加入甲醇溶解并稀释至刻度，超声提取 10 分 钟。第 2 份加入罕醇-25%盐酸 (4: 1) 溶液 35m} 溶解9 于水浴上水解 40 分钟，挥去熔剂，再用甲醉定溶于 10ml 容量瓶中，超声提取 10 分钟。第 3 份照第 2 份同法水解 后挥干溶剂，用乙酸乙酶萃取，挥去乙酸乙醋后加入甲醇 溶解并定洛于 10ml 容量瓶中，超声援取 10 分钟。结果表 明用甲醇直接溶解的样品分离效果不理想，水解样品及水 解后用乙酸乙酶萃取的样品在此 HPLC 条件下分离效果较 好。(2) 水解时间:考察了 30 分钟、 40 分钟、 60 分钟， 结果表明 40 分钟时水解基本完全。所以水解时间定为 40 分钟。 (3) 甲醇-25%盐酸 (4: 1) 水解溶液量:考察了 25m1 、35ml 、50时，结果表明水解溶液量对含量测定几乎 没有影响。故选定水解溶液最为 35mlo 回收率试验:精密称取一定量制皮素对照品，分别加 入到高中低三个不同量的山楼叶总黄酿提取物绍粉中?按 样品制备方法操作，测定加样回收率。平均回收率为 100.69%，RSD 值分别为 2.37%、0.80%、0.42% (n=3)。 重现性试验:平行 5 份样品，依样品测定项，进 行样品测定， RSD 为 2.39% (n=5) 。 样品制备及测定:取山楼叶总黄酣提取物 40mg ，精 密称定，放于三角瓶中，加入甲醇 -25%盐酸性:1) 溶溶 35ml 溶解，于水浴上水解 40 分钟，挥去溶剂，再用甲醇 溶解并定溶于 10ml 容量瓶中。超声提取 10 分钟，高速离 心，取上清液，进样 10ul，依色谱条件进行分离，测定。 对不同批次的山植叶总黄翻提取物共 5 批，依测定方法进 行样品处理及测定。结果，最高含量为 5. 67ugj鸣，最低 3 中文摘耍 中文摘耍 含量为 5. 32ug/mg ，平均含量为5. 56ug/吨。 结论: 1.山植叶提取物以总黄酶为有效成份，其化 学 成份复杂，且试与试元并存，内在质量难以控制，本文首 次建立了用高效液相色谱法测定出橙叶总黄酶 提取物中 制皮素含量的方法，该方法操作简便，结果准确， 重现性 好。 2. 用高效液相色谱法测定 5 批山植叶总黄酣提取物 中懈皮素含量，通过计算，其平均值为 5. 56ugj 吨。 第二部分山幢肘提取物总黄翻含量的测定 山楼口十提取物以总黄酣为有效成份，对其总贫困同含量 进行测定，在增强其疗效及提高内在质量方丽，都 是必不 可少的。 目的z 建立山植叶提取物的质蠢标准 方法和结果:以芦了为对照品?采用经典的染色比色 方法，照紫外分光光度法测定并进行方法学考察 。在此基 础上 F 对 5 批山植叶提取物的总黄酸含量进行测定 。 线性回归方程的建立:称取芦丁标准品 23吨，精密 称定，用乙醇雷已成不同浓度的标准溶液，以 5%亚硝酸锅 溶液、 10%的硝酸铝溶液、 4%的氢氧化纳试液染色 。以相 应的洛液为空白，照紫外分光光度法在 512nm 波沃处测定 吸收度。以吸收度