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摘要
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山橿活性部位筛选及其指纹图谱研究
山橿活性部位筛选及其指纹图谱研究
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摘 要
山橿 Lindera reflexa Hemsl.系樟科 Lauraceae 山胡椒属植物,为灌木或小乔木。 主要分布于河南(大别山、桐柏山和伏牛山南部)、江苏、安徽等地,而河南信阳 地区分布最广泛,且产量丰富,是山橿的主要产地(河南植物志 )[1]。山橿根或 根皮入药,性温,味辛,具有行气止痛,健脾消积,活血消肿等作用 ,且山橿在 长期的临床应用中收到良好的效果。在河南省民间用于治疗慢性胃炎,胃溃疡已 取得确切的临床疗效,而且有很长的历史。由于其良好的临床疗效和我省丰富的蕴藏 资源,被收入《河南省地方药材标准》[2]。1996 年河南省羚锐制药股份有限公司 又以山橿为主要原料成功开发了疗效确切的中成药制剂“胃痛宁片”。虽然山橿在 临床上有确切的治疗脾胃虚寒性胃炎、胃溃疡等作用,由于良好的临床疗效而备 受人们关注但有效部位不明确,缺乏系统的药理跟踪研究。需结合临床疗效,建 立多个药理模型,以药理或行为导向,进行有效部位和有效成分的系统研究, 阐 明其疗效的物质基础,以便为山橿的进一步开发利用提供科学的依据。为了明确 这一临床却有疗效的有效部位,建立能确切反映该药临床疗效的控制方法,控制 有效部位的质量,我们从以下几个方面对山橿进行研究:
第 一 部 分 : 山 橿 各 部 位 的 提 取 及 其 活 性 部 位 筛 选
采 用 极 性 不 同 的 系 统 溶 剂 用 水 蒸 汽 蒸 馏 法 对 山 橿 依 次 进 行 提 取 ,得 石 油 醚 部 位 , 乙 酸 乙 酯 部 位 , 正 丁 醇 部 位 和 水 部 位 。 山 橿 根 用 水 蒸 气 蒸 馏 法 得 挥 发 油 部 位 。 筛 选 山 橿 活 性 部 位 。 采 用 河 南 省 羚 锐 制 药 股 份 有 限 公 司 生 产 的 中 成 药 制 剂 “ 胃 痛 宁 片 ” 为 阳 性 对 照 药 组 , 其 他 给 药 组 分 别 为 挥 发 油 组 、 水 部 位组、 正 丁 醇 组 、 乙 酸 乙 酯 组 和 石 油 醚 组 ; 以 上 给 药 组 分 别 通 过 胃 溃 疡 模 型 实 验 , 疼 痛 模 型 实 验 , 炎 症 模 型 实 验 等 来 确 定 具 有 确 切 疗 效 的 给 药 组 药 物 为 山 橿 的 有 效 部 位 。
Wister 大 白 鼠 用 幽 门 结 扎 法 造 急 性 胃 溃 疡 模 型 , 用 醋 酸 法 造 慢 性 胃 溃 疡 模 型 , 分 别 用 以 上 给 药 组 灌 胃 给 药 ; 通 过 统 计 胃 溃 疡 面 积 和 溃 疡 抑 制 率 来 观 察 山 橿 不 同 提 取 部 位 对 Wister 大 白 鼠 胃 溃 疡 模 型 的 影 响 。小 鼠 用 扭 体 法 和 热 板 法 ,分 别 以 扭 体 次 数 和 痛 域 值 为 观 察 指 标 来 统 计 山 橿 不 同 提 取 部 位 对 小 鼠 疼 痛 模 型 的 影 响 。 小 鼠 用 二 甲 苯 致 耳 壳 水 肿 炎 症 模 型 , 以 两 耳 片 重 量 之 差 为 肿 胀 度 , 得 出 给 药 组 的 肿 胀 抑 制 率 。
结果 给 药 组 除 石 油 醚 组 外 均 比 阴 性 对 照 组 和 空 白 组 有 效 , 而 且 挥 发 油 、 乙 酸 乙 酯 部 位 效 果 显 著 , 正 丁 醇 部 位 有 效 , 水 部 位 和 石 油 醚 部 位 效 果 不 太 显 著。
第二部分 : 活 性 部 位 的 富 集 及 其 指 纹 图 谱 的 研 究 。
通 过 以 上 药 理 模 型 进 行 活 性 筛 选 实 验 ,确 定 乙 酸 乙 酯 部 位 和 正 丁 醇 部 位
为 活 性 部 位 ; 用 大 孔 吸 附 树 脂 进 行 活 性 部 位 的 富 集 。 依 次 用 D101、 AB-8、 HP-20、S-8 不 同 型 号 的 树 脂 以 吸 附 率 、得 膏 率 以 及 对 活 性 部 位 成 分 回 收 率 等 指 标 进 行 筛 选 ,最 后 得 S-8 为 最 佳 得 选 树 脂 。建 立 对 S-8 树 脂 的 方 法 学 考 察 , 结 果 确 定 工 艺 方 法 为 :取 预 处 理 过 的 S-8 型 大 孔 吸 附 树 脂( 湿 体 积 约 40mL), 按 径 高 比 1: 10 装 柱 。 用 蒸 馏 水 冲 至 无 醇 味 时 , 按 上 样 量 ( 生 药 量 ) 与 树 脂 体积比 1∶ 4 进 行 动 态 吸 附 。 先 取 山 橿 浸 膏
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