山羊脑包虫病研究-兽医专业论文.docxVIP

四川农业大学硕士论文 四川农业大学硕士论文 2010 四川农业大学硕士论文 四川农业大学硕士论文 2010 11111111111111111111111111111111111111111111111111 Y1800608 中文摘要 脑多头蝴病(俗称脑包虫病)是由带科、多头属 (Multiceps) 的多头带镣虫 (M Multiceps) 的中缭期幼虫(脑多头蝴 Coenurus cerebralis) 寄生于牛、羊等有 蹄类尊食动物所引起的…种寄生虫病，是危害养牛、学业健康发展的主要寄生虫 病之一。目前，该病只能采用药物和子术泊疗，但药物的长期使用易导致抗药虫 株的出现，尤其是存在药物在裔产品中的残留以及对环境的污染等问题，因此， 迫切需要寻找新的防治方法。为此，本研究开展了山羊脑包虫病的手术穿刺治疗， 多头带练虫四川虫株的生物学特性观察，多头带缘虫丁 m16 抗原基囚的克隆与原 核表达，同时分析了该基因的免疫原性，主要研究工作和结果如下: 1、了解多头带练虫的生活史及其成虫孕卵节片内虫师的数最和虫卵的大小， 同时观察次氯酸纳作用下虫卵的孵化过程，为今后该病的相关研究奠定基础。人 工感染2只实验犬，自粪便中出现节片的第一天起，开始记录每天排出的节片数 量，直至节片排出数量减少为零。其间，对实验犬随机排出的 50个事卵节片，以 1.0% 胃蛋白酶消化收集虫卵，进行虫卵计数和形态大小的观察。并用 1.0%次氯 酸纳溶液孵化虫卵，在显微镜下观察虫卵的孵化过程，拍照记录。两只实验犬分 别在感染后的第 45d、第50d开始排出节片且实验犬体内孕卵节片排出的持续时间 分别为 142 d和54d，实验犬每日排节片数最高可达64片。事卵节片内虫卵数最少 约为780枚，最多约为 16035枚，平均为: 5278.800士3696.769枚，虫卵数量主要集 中在2000--6000 范围内，共占总节片数的 52%。虫卵大小为(3.74土2.71)阴阳 (32.33士2.09) 阳no 2、利用RTR-PCR 技术从激活的多头带练虫六钩拗中获得多头带练虫的 Tm16 cDNA ，将其重组于原核表达载体pET32a 中，构建pET32a-Tm16 表达载体，转化 至大肠杆菌BL21 中，经IPTG诱导表达了融合蛋白。获得了 Tm16 cDNA ，其序列 长度为569bp ，包括399bp的开放性阅读框。 SDS分析显示:茧组表达质粒 产生了大小分别为 30.69 kDa的目的条带，其中丁m16蛋白的分子量约为 12.71 kDa，与预期结果一致;Westem blotting试验显示重组蛋白可与感染脑包虫的羊 的血清发生反应。得到结论， Tm16基因很保守，重组 Tm16蛋白可作为脑包虫疫 苗的主要抗尿。 趴在某规模羊场就脑包虫病患羊采用对患部穿刺的方法开展临床治疗，手 术时不取出头节，操作简单快捷，手术时间 2-5分钟，治疗三例，在 1年内存活率 达100%。 关键词t 多头带缭虫;节片数量;虫卵萤;虫卵孵化;脑多头蝴; Tm16基因; 尤隆;jf.核表达;穿刺手术 Abstract Studies 00 Cerehral Echinococcosis of Goats Cerebral Echinococcosis is a parasitic dise邸e caused by the metacestode larvae (Coenurus cerebralis) of Taenia multiceps (M Multiceps) which parasitiz创 ca:忧le， sheep and other ungulate herbivores. It is one ofthe major parasitic diseases.which is ham巾1 to the development of cattle and sheep industry. At present ，this disease can only be treated by drugs and surgery，but long-term use of drugs easily lead 阳由e emergence of drugωresistant strains. Particularly ，there are problems about 伽ug residues in livestock products and environmental pollution. Therefore，its an urgent need to find new control met