桑黄胞内多糖的分离纯化、活性及理化性质研究-微生物学专业论文.docxVIP

论文独创性声明 啊!jj4411 本人郑重声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的 成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人 或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构 的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在 论文中作了明确的说明并表示了谢意。 研究生签名:王备将 }J{司年 4 月 {o 日 关于论文使用授权的声明 本人克全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权保留井向回家有 关部门就机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被带阅和借阅，可以采用影印、缩印成归描等 复制手段保存、汇编学位论文。同意凹川农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位 论文的全部或部分内容。 研究生签名:头看待 为{Q 年 j 月 h 日 导师签名 7伊 -v?7t7 年 4 月 日 摘要 本研究以桑黄菌丝体作为研究材料，对桑黄的主要活性成分一一多糖进行提取纯 化研究，并对不同多糖组分进行活性及理化性质研究，旨在为桑黄的基础研究和应用 开发奠定基础。 以多糖得率为考察指标，采用单因素和正交试验对热水、超声波、超声波复合酶 三种提取方法中影响菌丝体多糖提取得率的主要因素进行研究。研究结果表明，热水 浸提泌的最佳工艺条件为处理时间 3.5h ，料液比1:50，温度90C ，多糖的提取率为 2.47%; 超声波法的最佳工艺条件为超声处理时间 2Omin ，料液比1:25，功率500W ， 多糖提取率为 3.356% ;超声波复合酶法的最佳工艺条件为 pH6.5 ，酶解温度50.C ， 纤维素酶 2.5%、果胶酶 2.5%、蛋白酶1%(%对底物)，酶解时间 12仇nin ，多糖提取率 为 6.619% 。 采用了三氯醋酸(丁 CA)法，对丁CA 含量以及去除次数对去蛋臼效果进行研究。研 究结果表明，当 TCA 含量为 7.5% ，去除次数为3 次，得到较好的去除效果，此时蛋 白质的去除率为 83.28%，多糖的损失事为11.91%。 采用 DEA巳52 阴离子交换柱和葡聚精凝胶 Sephadex G100 柱层析纯化后，阴离 子柱阶段洗脱得到 PB 1 PB 11 两个组分，葡聚糖 i娱胶 S叩hadex G-I00 柱层析分别得 到了 PB 1 -1 PB 11-1 两个组分，经过 HPLC 鉴定为单L对称峰，为均一性多糖。 分别对桑黄粗多糖和纯化组分免疫活性进行研究，研究结果表明，桑黄粗多糖、 PB II-l 显著提高小鼠单核臣噬细胞系统的吞噬功能，均能提高小鼠的廓清指数和吞 噬指数，且一定程度上提高免疫低下组小鼠的免疫能力， PB 1 -1 有一定效果但不显 著。桑黄粗多糖， PB II-l 均能显著促进小鼠的溶血索生成，且一定程度上促进免疫 低下组小鼠溶血素生成， PB 1 -1 有一定效果徊不显著。 理化性质研究表明， PB 1 -1 分子最约为 47400 ，而PB 11-1 分子最约为 8710。两 个组分都有糖类特征吸收峰， 869町1 附近的吸收峰说明多糖为 ?-P比喃糖背键。 PB 1 -1、PB II-l 都由鼠李糖、阿拉伯糖，木糖，葡萄糖和半乳糖组成，其摩尔比分 别为 3.47:1.99:1:63.27:13.44 和 10.46:1:1.03:182.75:30.940 关键词:桑黄多糖，提取，纯化，生物活性，理化性质 ABSTRACT Mycelium of Phellinus baumii 制 research materia1， the main active ingredient- polysaccharidess extraction，purification ，biologica1 activity，physicochemical properties W町e studied in this paper，and is designedω Phellinus baumii of basic research and application providing a theoretical basis and solid foundation. Using single factor and orthogonal to Phellinus bαumii mycelium extraction of polysaccharide as indicator. Test main factors of hot wat町 ultrasound ，ul位as