微生物对腐霉利在土壤中降解的影响研究.docVIP

PAGE PAGE 1 微生物对腐霉利在土壤中降解的影响研究 　　摘要为了进一步加强腐霉利自然降解机制的研究，在实验室条件下，研究了微生物对土壤中腐霉利降解的影响。结果表明：在施用56d后，腐霉利在土壤中的消解率均在90％以上。腐霉利在土壤中的降解动态规律符合一级动力学模型。腐霉利在灭菌和未灭菌土壤中的半衰期分别为14.1、9.4d。微生物的参与有利于腐霉利在土壤中的降解。 　　关键词腐霉利；微生物；降解 　　中图分类号X503文献标识码A文章编号1007-5739（2012）22-0209-02 　　腐霉利（procymidone）又名速克灵、杀霉利、二甲菌核利，属于低毒性杀菌剂，主要是抑制菌体内甘油三酯的合成，具有保护和治疗的双重作用。适用于果树、蔬菜、花卉等菌核病、灰霉病、黑星病、褐腐病、大斑病的防治[1-2]。它作为高效杀菌剂被广泛使用的同时，残留问题也日益突出。为了评估其对土壤环境的危害，了解其在土壤中的降解速率以及与土壤微生物间的相互关系，选择厦门市具有代表性的土壤作为供试土壤，在实验室控制其他因素的条件下，开展腐霉利在灭菌及不灭菌土壤中的降解研究。 　　进入土壤中的农药主要来自直接施用或叶面喷施，为了评估其对环境的危害，了解其在土壤中的降解规律是非常重要的。农药在土壤中同时存在生物和非生物2种类型的降解和转化[3]。影响其降解速率的因素有土壤特性、温度、湿度及农药特性等[4]。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　1.1.1试验仪器。Agilent-7890N型气相色谱仪（美国安捷伦公司）、恒温振荡器（国华企业）旋涡混合器（上海琪特分析仪器有限公司）、氮吹仪（广州智真生物科技有限公司）、美国centurionK220型多功能高速离心机等常用实验仪器。 　　1.1.2试验试剂。弗罗里矽柱（1000mg/6mL，安捷伦公司）、腐霉利标准品（农业部环境保护科研监测所）。乙腈、甲醇、丙酮、正己烷为色谱纯，其余试剂均为分析纯。 　　1.1.3供试土壤样品的采集、处理和性质。采集厦门市具有代表性的无腐霉利残留的土壤。将耕层（0～20cm）土壤样品研碎，风干过2mm筛后备用。 　　1.2腐霉利在土壤中的降解试验 　　1.2.1土壤的活化培养。试验前将土样分别置于搪瓷盆中，含水量添加到土壤饱和持水量的60%，用薄膜覆盖盆口，放在25℃恒温培养箱中进行微生物活化培养1周。 　　1.2.2试验设计。设4个处理，分别为添加腐霉利灭菌土、空白灭菌土、添加腐霉利未灭菌土、空白未灭菌土。每个处理3次重复，处理土样置于25℃培养箱中恒温培养。土壤中腐霉利的添加浓度为4mg/kg。添加农药后1、3、5、8、14、21、28、42、56d采样测定腐霉利残留量及土壤含水量。 　　1.3腐霉利残留分析方法 　　1.3.1样品处理[5-6]。称取匀浆试样5.0g，加入乙腈25.0mL，旋涡混匀后，在恒温振荡器上振荡提取30min。高速离心（8000r/min）5min后，取乙腈5.0mL提取液于离心管，缓缓通入氮气，将乙腈吹近干，加入正己烷2.0mL溶解残留，待净化。 　　将弗罗里矽柱用丙酮5.0mL+正己烷（10+90）、正己烷5.0mL预淋洗，条件化，当溶剂液面到达柱吸附表面时，立即加入上述待净化液，用15.0mL离心管收集洗脱液，再用丙酮5.0mL+正己烷（10+90）冲洗烧杯后淋洗弗罗里矽柱，重复1次。把收集液的离心管置于氮吹仪，水浴温度50℃，氮吹蒸发至近干，用正己烷定容到合适的浓度，在混合器中混匀后，待测。 　　1.3.2色谱条件。色谱柱：100%聚甲基硅氧柱（DB-1MS）30m×250μm×0.25μm；柱温：80℃（保持1min）230℃（保持1min）270℃（保持10min）；进样口及温度：毛细管进样口，240℃；检测器及温度：u-ECD，320℃；分流模式：不分流；进样量1μL；载气：高纯氮气1.2mL/min，恒流；尾吹：高纯氮气60.0mL/min。 　　1.4方法的准确度、精密度与最低检测浓度 　　取空白土样5.0g，分别添加质量浓度为0.10、0.50、1.00mg/kg腐霉利，按照上述方法对待测样品进行处理和测定，每个处理有3个平行，计算加标回收率，结果见表1。可看出，土样中腐霉利加标回收率为78.3％～91.1％，RSD值为2.2％～3.9％。该方法土壤中腐霉利的测定下限为0.01mg/kg。表明该分析方法符合农药残留试验的要求。 　　2结果与分析 　　（1）空白灭菌与未灭菌土壤都未检出氯氰菊酯残留。 　　（2）在试验过程中，添加腐霉利后经过一段时间的培养，按不同的时间间隔取样分析。结果表明，无论灭菌与否，随着培养时间的延长，添加到土壤中的腐霉利含量均逐渐降低，两者之间具有一定的相关性，这和胡瑞兰等的研