赖氨酰氧化酶在大鼠急性脊髓损伤修复过程中的作用-外科学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 The Critical Role of Lysyl Oxidase(LOX) in the Healing Process after Acute Spinal Cord Injury of Rats Dissertation Submitted to North China University of Science and Technology in partial fulfillment of the requirement for the degree of Master of Medicine by LiLei (Surgery) Supervisor: Professor BaiJunQing June, 2015 独 创 性 说 明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的 地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含 为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材 料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了 明确的说明并表示了谢意。 论文作者签名： 日期： 年 月 日 关于论文使用授权的说明 本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文， 学校有权保 留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论 文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检 索和交流。 作者及导师同意论文公开及网上交流的时间： □ 自授予学位之日起； □ 自 年 月 日起。 作者签名： 导师签名： 签字日期： 年 月 日 签字日期： 年 月 日 摘 要 摘 要 目的 本研究旨在探讨赖氨酰氧化酶（LOX）能否在大鼠急性脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）修复过程中起着重要作用。 方法 将 96 只成年雌性 SD 大鼠分为 A、B、C、D 四组，A 组（n=30）为 β-氨基 丙腈组（β-Aminopropionitrile，BAPN，一种 LOX 活性抑制剂），B 组（n=30）为 氯化钴组 （ CoCl2 ， 一 种 LOX 表达促 进剂 ） ， C 组 （ n=30 ） 为单纯损伤组 （injury），D 组（n=6）为正常对照组（sham）。在采用 Allen’s 方法成功地复制 大鼠急性脊髓挫伤模型的基础上，设定相同打击力度。在损伤后不同时间段[1、 3、7 、14 和 30 天 （d） ，每 个时间 点 n=6]切取实 验脊 髓段 。采用 免疫 组化 （IHC）和免疫印迹（Western blot）检测 LOX 在脊髓损伤组织中的表达，并分析 A、B、C 与 D 组之间差异性。应用 BBB 评分法评估损伤后大鼠后肢运动的恢复 状态， 同时分析 A、B、C 组不同时间段 LOX 表达与肢体运动恢复状态的相关 性。 结果 BBB 评分结果显示氯化钴组（B）后肢运动的恢复状态分数明显高于 β-氨 基丙腈组（A）和单纯损伤组（C），且 A 组最低。免疫组化结果显示：在所有实 验时间段脊髓损伤组（A、B、C 组）的 LOX 阳性细胞数显著高于对照组。例如在 损伤后 1d，A、B、C 组的 LOX 阳性细胞数/视野分别为 27.46±3.5，64.67±3.0，和 41.67±2.3，而对照组的 LOX 阳性细胞数只有 6.04±0.2。 进而，在所有实验时间段 的 LOX 阳性细胞数，氯化钴组（B）高于（A、C 组），而 β-氨基丙腈组（A）低 于单纯损伤组（C）。例如在损伤后 3d，单纯损伤组（C）的 LOX 阳性细胞数升 达顶峰 46.34±3.4，对应之氯化钴组（B）和 β-氨基丙腈组（A）阳性值分别为 74.81±4.9 和 37.64±3.6。免疫印迹结果显示，与对照组（D）相比，氯化钴组（B） 在损伤后 1d LOX 表达增加，3d 达到高峰，7d 时有所下降，14d 和 30d 时明显减 少；β-氨基丙腈组（A）与氯化钴组（B）和单纯损伤组（C）相比，LOX 表达曲 线基本相同，但表达率却比后者明显低弱，氯化钴组（B）LOX 表达明显高于 β- 氨基丙腈组（A）和单纯损伤组（C）且 β-氨基丙腈组（A）最低。相同时间段间 两两比较都具有统计学意义（P＜0.05）。 结论 SCI 放大脊髓 LOX 表达。氯化钴强化 LOX 表达加速脊髓损伤的愈合； 而 BAPN 灭活 LOX 活性延缓损伤脊髓的恢复。BAPN 和 CoCl2 引起 LOX 表达的改 变与 BBB 大鼠后肢运动的恢复评分高低呈正相关，由此说明 LOX 作为重要的抗 - I - 华北理工大学硕士学位论文 损伤