辣白菜中分离魏斯氏菌及其质粒的序列分析-生物化工专业论文.docxVIP

河北 河北工业大学硕士学位论文 辣白 辣白菜中分离魏斯氏菌及其质粒的序列分析 辣白菜中分离魏斯氏菌及其质粒的序列分析 摘 要 为了探讨魏斯氏菌在辣白菜中起的作用和获得与明串珠菌相关乳酸细菌的 质粒，并对质粒进行初步研究，故分离获得魏斯氏菌。 本课题是以辣白菜发酵汁为原料。首先通过形态特征筛选出疑似魏斯氏菌， 再通过生长特性、生理生化检测对该菌进行初步鉴定。该菌表现出的形态为短杆 状，一头较窄一头较宽，经革兰氏染色显示为紫色。在 37°C 生长，2°C 弱生长， 能承受 3%的 NaCl，而不能承受 6.5%的 NaCl 浓度，过氧化氢酶阴性，能够水解 精氨酸和七叶苷，能够产生葡聚糖，并且经葡萄糖发酵产酸产气。综合上述特性， 参照《乳酸细菌分类鉴定及实验方法》和《伯杰细菌鉴定手册》初步确定为魏斯 氏菌。为了确定该魏斯氏菌的分类地位，本课题又做了 16S rDNA 的序列分析， 构建了魏斯氏菌的系统发育树，进行了 16S rDNA 序列的同源比对，确定该菌为 Weissella cibaria。将其命名为 kimshi006，其 16S rDNA 在 NCBI 上的登录号为 HM369807。 为了进一步了解该魏斯氏菌，本课题对魏斯氏菌的质粒进行了提取。由于魏 斯氏菌质粒的拷贝数并不多，并且在提取过程中杂质很多，用经典的碱裂解法不 能获得质粒。本课题根据魏斯氏菌的特性，改进了碱裂