仪器分析毛细管电泳法.ppt

第五章 毛细管电泳法;婶谈锁盛脂价博北涝蛾十捣靖牟硫否探敢赌探奖曼勃杉惭咽墙盼吞由牢仟仪器分析毛细管电泳法仪器分析毛细管电泳法; 本章要求 ⒈ 了解电泳、淌度、电渗的概念 ⒉ 了解毛细管电泳仪的结构 ⒊ 了解六种毛细管电泳分离模式 ; 毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）又称高效毛细管电泳（HPCE），是以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的液相分离技术。 CE 实际上包含电泳、色谱及其交叉内容，使分析化学得以从微升水平进入纳升水平，并使单细胞分析，乃至单分子分析成为可能。生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机。;5.1 基本概念和原理;2. 毛细管电泳：CE;毛细管的内径比头发丝还细得多;3. 淌度; ;在毛细管中电渗速度可比电泳速度大一个数量级，所以能实现样品组分同向泳动。正离子的运动方向和电渗流一致，最先流出；中性粒子的电泳流速度为“零”，其迁移速度相当于电渗流速度；负离子的运动方向和电渗流方向相反，但因电渗流速度一般都大于电泳速度，在中性粒子之后流出，从而因各种粒子迁移速度不同而实现分离。;电渗流的作用：;铂电极;1. 进样系统;5.3 毛细管电泳分离模式;1. 毛细管区带电泳 (CZE) 用CZE时，整个系统用一种缓冲溶液 (背景电解质)，根据各组分荷质比不同而分离。背景电解质仅起 传导电流的作用。 t ＝ 0 t ＞ 0;2. 毛细管等速电泳（CITP）;3. 毛细管等电聚焦 (CIEF) 基本操作步骤：进样、聚焦和迁移，用于生物大分子的分离。;4. 毛细管电色谱 (CEC) 分为填充柱和开管柱两种方式，可分离离子和中性分子，且可分离手性分子。;5.4 毛细管电泳特点及应用; ;3. 应用; 本章要求 ⒈ 了解电泳、淌度、电渗的概念 ⒉ 了解毛细管电泳仪的结构 ⒊ 了解六种毛细管电泳分离模式