KJ02-食品卫生微生物学检验-副溶血性弧菌检验..pptVIP

BP平板： 胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和痕量矿物元素 丙酮酸钠是一种生长促进剂 亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒性，并使菌落产生黑色 卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环 甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。 在BP平板上其典型菌落为：圆形，光滑突起，湿润，直径2-3mm，颜色呈灰色到黑玉色，边缘常为淡色（米黄色或灰白色略带灰色或黄色的白色），周围为一混浊带，在其外缘常有一透明圈。用接种针接触菌落似有黄油树胶的粘稠感。 偶然会遇到不分解脂肪菌株，除无混浊带及透明圈外，其他外观基本相同。 金黄色葡萄球菌可以产生凝固酶，因此对其鉴别的主要实验是测定其凝固酶。 对于凝固不完全的菌株，可以通过一些其他实验来进一步确认。 所有这些实验不能作为鉴别其产毒与否的依据。 血浆凝固酶 * ????????????????????????????? 内蒙古食品药品检验所 张彦斌 * 1、概述 2、范围 3、生物学特性（菌体形态学特征、培养特性、抵抗力） 4、检验程序 5、培养基和试剂 * 1、概述 副溶血性弧菌（ Vibrio parahaemolyticus ）是分布极广的海洋细菌，为引起食物中毒重要的病原细菌之一，尤其是在夏秋季节的沿海地区，经常发生由于食用带有大量副溶血性弧菌的海产食品，引起爆发性食物中毒。 历史：副溶血性弧菌食物中毒于1950年在日本首发，副溶血性弧菌（V. parahemolyticus）于我国大陆沿海地区食物中毒中最常见的一种病原菌。 中毒原因:烹调时未烧熟、煮、透,或熟制品污染后未再彻 底加热。 中毒食品:副溶血性弧菌食物中毒多发生在海产品大量上 市时。中毒食品主要是海产品,其次为咸菜、 熟肉类、禽肉、禽蛋类,约有半数为腌制品。??? ??? ??? * * 2、范围 本标准规定了副溶血性弧菌检验方法。 本标准适用于动物性水产干制品、腌醉制生食动物性水 产品、即食藻类食品、鱼糜制品等水产食品和水产调味 品以及食物中毒样品中副溶血性弧菌的检验。 * 3、生物学特性 1）菌体形态学特征 2）培养特性 3）抵抗力 4）致病性 1）菌体形态学特征 本菌为G-，可两端浓染 ，多形态，无芽孢，单端单鞭毛，有嗜盐特性，在30-37℃最适温度时增长较快，一般冬季不易检出。 多形态： 弧状、逗点状 球状、丝状、 杆状、棒状等。 * 2）培养特性 嗜盐：VP 在含氯化钠5 –(20-30－最适) g／L的培养基 上生长，无盐和110g ／L以上不生长。 生长温度：最适为37℃，4 ℃不生长 pH: 最适pH为7.4-8.0 需氧性:需氧性很强， 厌氧条件下生长缓慢 * 3）抵抗力 敏感：淡水等无盐环境 不耐热 对酸敏感，在2％冰醋酸或食醋中立即死亡， 对氯、碳酸、来苏水等一般化学消毒剂敏感： 对磺胺噻唑、氯霉素、合霉素敏感。 耐受：耐高浓度NaCl－海水，盐渍酱菜中存活时间较长； 耐低温的抵抗力较强 耐青霉素、磺胺嘧啶。 * 4、检验程序 25g样品+3%氯化钠碱性蛋白胨水 TCBS平板 36± 1℃ 18h 1、镜 检 3、三糖铁试验 2、氧化酶试验 4、嗜盐试验 报告结果 定性 检测 36± 1℃ 24h 36± 1℃ 24h 36± 1℃ 6h 科玛嘉弧菌平板 生化实验 API 20 E * 5、培养基和试剂 5.1 3%氯化钠碱性蛋白胨水： 增菌用，高盐 5.2 TCBS琼脂： 5.3 科玛嘉琼脂： 分离培养用 * TCBS上的副溶血弧菌菌 科玛嘉上的副溶血弧菌菌落 * 5.4 ：初步鉴定 3.5％氯化钠三糖铁琼脂：底层 变黄，斜面不变色，有动力， 不产生硫化氢. 镜检形态：本菌为G-，可两端 浓染 ，多形态，无芽孢。 氧化酶试验：VP为氧化酶阳性。 嗜盐性试验：0%不生长