第六章植物细胞制医药.pptVIP

果实和蔬菜：最大优势是它们可以直接食用或半加工以后食用。因此非常适合于生产疫苗或食物添加剂。土豆已被用于生产人类诊断用蛋白和人奶中所含蛋白，利用土豆生产的疫苗也已被准许应用于人类的临床试验。西红柿和大白菜也是生产人用抗体的常用材料。除此之外，香蕉、胡萝卜、莴苣等也被用为载体生产转基因疫苗。 五、转基因植物疫苗 1、用转基因植物生产基因工程疫苗具有其独特的优势: ①植物细胞的全能性; ②完整的真核细胞表达系统,使表达产物具有较好的免疫原性及生物活性; ③口服植物疫苗接种方便，能有效诱导粘膜免疫反应; ④植物细胞的细胞壁起到生物胶囊的作用; ⑤生产简便、成本低廉,不需要冷藏和低温运输; ⑥安全性好,无外源性病原污染等。 发根生物反应器结构及其培养系统的研究主要集中在： 一是尽可能减低机械剪切力对发根的损伤（减少搅拌）； 二是提高气液传质速率，增加溶氧量 研究现状 人参（Panax ginseng）：在无外源激素的条件下，发根生长速度为用激素诱导根，人参皂甙含量最高可达干重的0.95％ 长春花（Catharanthus roseus）：从发根中检测到细胞培养中一直未能得到的长春碱和长春新碱 亲本植株能合成的次生代谢物都可用发根培养生产 发根培养是利用生物技术生产次生代谢物的新的有效途径 存在的问题及措施 有些植物发根难诱导，各转化系统相对独立，无模式系统 大量筛选菌种，采用合适的外植体，综合利用各种理化因子 有些发根生长不太快，有些难以维持正常的形态，常出现脱分化形成愈伤组织或分化出幼苗、胚状体等现象，致使生产能力下降、培养失败 采用合适的培养方法，必要时调节营养及激素水平，使发根维持正常的形态及快速生长和次生物质生产能力 难以大规模培养 选用通气性能良好且无机械搅拌的反应器 采用两相培养法或在培养基中加入诱导子使代谢物分泌到培养基中并及时收集，以减少其对生长的不利影响 第六节 植物细胞培养的生物反应器 由于植物细胞的固有性质，如细胞容易聚集，细胞分化，细胞的脆弱性，代谢途径和代谢产物形成与细胞生长关系的复杂性，选择合适的反应器构型及操作方法极大地关系到植物细胞的代谢产物合成。 （一）植物细胞悬浮培养特点 1、年幼的细胞内含有多个小液泡，而衰老细胞含有单个大液泡,细胞对渗透压及物理压力变化很敏感。另外，液泡与二次代谢产物积累及废物排放有关。 一、植物细胞悬浮培养特征及参数 4、植物细胞的需氧量较低，最大氧摄入速率1-3.5mM/h, 而微生物细胞是5-90mM/h。 3、在细胞培养中，植物细胞代谢缓慢，生长速率低，需要很长时间的培养过程，而长时间保持无菌状态给培养带来难度。 5、植物细胞易于粘附成团使搅拌不匀而导致营养物质的传输受到限制。 6、与微生物相比，植物细胞二次代谢途径非常复杂，并且代谢物生产通常与细胞变形分化有关，从而使不同细胞的生产速率常常不一致。 2、与微生物相比，它对剪切力更为敏感。 （二）植物细胞的聚集与粘附 1、植物细胞不象动物细胞以单个细胞存在，它们有成团的倾向。 2、植物细胞的聚集有两种形式： （1）发生在培养前期，年幼的细胞迅速分裂，产生的新细胞不能及时分开，于是细胞便积聚在一起。 （2）发生在培养后期，主要在对数生长后期，由于多糖物质及蛋白质的分泌，细胞容易相互粘附。 4、细胞聚集程度与细胞的生长阶段有很大关系。 3、细胞还粘附在容器的壁表面、电极上。这种形式的聚集体较大，往往给培养带来不利的影响。 5、不同尺寸的聚集体中二次代谢产物的含量不同， 6、聚集体的形成也有有利的一面，细胞团内的扩散受限制可导致中心细胞的分化。中心细胞的分化可刺激聚集体周围的细胞，从而提高二次代谢产物的产量。但聚集体的有利影响通常与聚集体大小联系在一起，聚集体过大反而会使产量降低。 （三）溶氧和气体成分 1、植物细胞对氧需求较微生物低。但由于植物细胞培养的高密度及高粘度特性，氧的传输会受到阻碍。 2、一定条件下溶氧量的增加有利于培养细胞中代谢产物的生成与积累。 3、高通气和氧浓度过高均会不利于植物细胞生长，因为高通气下气泡带来的扰动使细胞处于更强的剪切环境下。另外，溶氧水平过高会使细胞代谢受阻。 （四）流体性能 1、在植物细胞培养后期，由于聚集体形成、生物量的增大，目前普遍使用粘度仪测定不同转速下的液体粘度来衡量。 2、细胞浓度、细胞团大小和细胞变形是影响培养液流变性能的主要因素。 3、在细胞培养中，流体性能直接影响溶液的混合和物质传输，因而影响细胞生长及次级代谢。 （五）剪切力 1、气-固作用：包括气泡的凝聚和破碎对细胞产生影响。 2、固-固作用：细胞与细胞，细胞与搅拌器、探头和容器壁的碰撞和磨擦。 3. 对数生长期和静止期